[发明专利]异喹啉生物碱及其制备方法和应用

权利要求书

1.异喹啉类生物碱化合物，其特征在于，具有式Ⅰ结构通式：

其中，R1、R2、R3、R4分别为下述之一

-OH，

-O(CH₂)_nR’，n为自然数，R’为卤代基或-CH₃，

R5为-H或-OH。

2.根据权利要求1所述的异喹啉类生物碱化合物，其特征在于，所述R’为-CH₃；且0≤n≤10，优选的0≤n≤5。

3.权利要求2中异喹啉类生物碱化合物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

提取：取干燥的青风藤原药材、粉碎、溶媒提取、合并提取液、用旋转蒸发仪减压除去溶媒、得青风藤提取物；

萃取：用不同极性的溶媒对青风藤提取物进行萃取、合并萃取液、用旋转蒸发仪减压除去溶媒、得不同极性的萃取物；

纯化：用柱色谱法对不同极性的萃取物进行分离纯化。

4.根据权利要求3所述的异喹啉类生物碱化合物的制备方法，其特征在于，提取步骤和萃取步骤中的溶媒分别至少包括水、无水乙醇、含水体积比为5～70％的乙醇、无水甲醇、含水体积比为5～70％的甲醇、环己烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、含水体积比为5～70％的丙酮、正丁醇以及二氧化碳超临界流体中之一；和/或

提取步骤中的提取方法至少为渗漉法、浸渍法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法以及超临界流体提取法中任一。

5.根据权利要求3所述的异喹啉类生物碱化合物的制备方法，其特征在于，纯化步骤中的柱色谱法至少包括大孔树脂柱色谱法、硅胶柱色谱法、葡聚糖凝胶柱色谱法、反相柱色谱法、高效液相色谱法中之一；

优选的，

大孔树脂柱色谱法为：洗脱液为甲醇和水的混合液，洗脱方法为二者比例5:5～10:0依次梯度洗脱；

硅胶柱色谱法为：硅胶粒度为100～200目，洗脱液为丙酮和乙酸乙酯的混合液，洗脱方法为二者比例5:1～1:1依次梯度洗脱；

葡聚糖凝胶柱色谱法：洗脱液为三氯甲烷和甲醇的混合液，洗脱方法为二者比例2:1～1:2依次梯度洗脱；

反相柱色谱法：洗脱液为甲醇和水的混合液，洗脱方法为二者比例7:3～10:0依次梯度洗脱；

高效液相色谱法：洗脱液为甲醇或乙腈与水、磷酸及三乙胺或二乙胺的混合液，四组分的比例(4～6)：(0～6)：(0～0.01)：(0.05～1)，依次梯度洗脱。

6.根据权利要求5所述的异喹啉类生物碱化合物的制备方法，其特征在于，高效液相色谱法步骤为下述任一：

a.高效液相色谱的洗脱液为甲醇、水、磷酸和三乙胺的混合液，洗脱方法为四者的比例4:6:0.01:0.01～9:1:0.01:0.01，依次梯度洗脱，

b.高效液相色谱的洗脱液为乙腈、水和二乙胺的混合液，洗脱方法为三者的比例6:4:0.005～10:0:0.005，依次梯度洗脱，

c.高效液相色谱的洗脱液为乙腈、水和三乙胺的混合液，洗脱方法为三者的比例5:5:0.01～9:1:0.01，依次梯度洗脱，

d.高效液相色谱的洗脱液为乙腈、水、磷酸和三乙胺的混合液，洗脱方法为四者的比例5:5:0.01:0.01～10:0:0.01:0.01，依次梯度洗脱。

7.权利要求1所述的异喹啉类生物碱化合物在制备抗肿瘤制剂中的应用。