[发明专利]结合过氧化氢酶的核酸适配体及应用

说明书

本发明公开了一种结合过氧化氢酶的核酸适配体，选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的核酸适配体中的任意一种或多种。本发明还公开了一种包括该结合过氧化氢酶的核酸适配体的肌酐检测试剂盒。本发明还公开了一种非诊断目的的肌酐检测方法。

技术领域

本发明涉及临床检验技术领域，具体涉及一种结合过氧化氢酶的核酸适配体及应用。

背景技术

核酸适配体(Aptamer)是一种利用体外筛选技术-指数富集的配体系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX)得到的结构化的寡核苷酸序列(DNA或RNA)，对相应的靶标分子(蛋白质，病毒，细菌，细胞，药物等)具有特异性识别能力和高度的亲和能力。

肌酐，化学式是C₄H₇N₃O，是肌酸在人体代谢的终末产物，主要由肾小球滤过排出体外。血清肌酐是评价肾小球滤过功能的有效指标，临床常用于肾功能监测以及肾功能衰竭患者透析治疗的指征。肌酐的主要临床检测方法为苦味酸法和肌氨酸氧化酶法，苦味酸法因为其具有毒性且抗干扰能力差、不稳定等原因逐渐被淘汰，而肌氨酸氧化酶法因为其良好的准确性、线性、稳定性等，逐渐在临床检测中占据主导地位。

肌酐的肌氨酸氧化酶法测定是目前临床使用最广泛的肌酐检测方法，其原理为①第一步利用肌氨酸氧化酶和肌酸眯基水解酶将内源性肌酸转化为不可被肌酐酶催化的物质，同时产生的H₂O₂被过氧化氢酶分解，从而消除了内源性肌酐的干扰②第二步，肌酐酶将样品中的肌酐转化为肌酸，肌酸经过肌氨酸氧化酶和肌酸眯基水解酶催化反应产生H₂O₂，同时第二步试剂中添加了过氧化氢酶抑制剂(通常为0.1％的叠氮化钠)，此时反应产生的H₂O₂不可被分解，从而可以使用trinder’s反应对其定量，从而间接得到样品中肌酐的浓度。但是，由于叠氮化钠是剧毒物品，存在安全性问题，给检测造成不便。

发明内容

基于此，有必要针对肌氨酸氧化酶法测定肌酐时过氧化氢酶抑制剂的选择问题，提供一种结合过氧化氢酶的核酸适配体及应用。

一种结合过氧化氢酶的核酸适配体，选自如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ IDNO.6所示序列的核酸适配体中的任意一种或多种。

一种肌酐检测试剂盒，包括所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体。

在其中一个实施例中，所述试剂盒包括用于转化内源性肌酸的R1试剂，所述R1试剂包括过氧化氢酶。

在其中一个实施例中，所述试剂盒还包括用于转化肌酐的R2试剂，所述R2试剂包括如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体；优选地，所述结合过氧化氢酶的核酸适配体在R2试剂中的浓度为1nmol/L～100nmol/L，优选为5nmol/L～20nmol/L。

在其中一个实施例中，所述试剂盒还包括抗羟苯磺酸钙干扰试剂，优选地，所述抗羟苯磺酸钙干扰试剂选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体中的任意一种或多种；更优选地，所述抗羟苯磺酸钙干扰试剂单独存在于R1试剂或R2试剂中，或同时存在于R1试剂和R2试剂中。

在其中一个实施例中，所述结合羟苯磺酸钙的核酸适配体在R1试剂或R2试剂中的浓度为1nmol/L～100nmol/L，优选为5nmol/L～20nmol/L。