[发明专利]结合过氧化氢酶的核酸适配体及应用在审
申请号: | 202110969990.X | 申请日: | 2021-08-23 |
公开(公告)号: | CN113817742A | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
发明(设计)人: | 杜军;王存理;曹文刚;吴慧 | 申请(专利权)人: | 湖北擎科生物科技有限公司;北京擎科生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12Q1/34;C12Q1/30;C12Q1/28;C12Q1/26 |
代理公司: | 北京华进京联知识产权代理有限公司 11606 | 代理人: | 彭辉 |
地址: | 436000 湖北省鄂州市葛*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结合 过氧化氢酶 核酸 适配体 应用 | ||
1.一种结合过氧化氢酶的核酸适配体,其特征在于,选自如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示序列的核酸适配体中的任意一种或多种。
2.一种肌酐检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体。
3.根据权利要求2所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于转化内源性肌酸的R1试剂,所述R1试剂包括过氧化氢酶。
4.根据权利要求2所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括用于转化肌酐的R2试剂,所述R2试剂包括如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体;优选地,所述结合过氧化氢酶的核酸适配体在R2试剂中的浓度为1nmol/L~100nmol/L,优选为5nmol/L~20nmol/L。
5.根据权利要求2所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括抗羟苯磺酸钙干扰试剂,优选地,所述抗羟苯磺酸钙干扰试剂选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQID NO.3所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体中的任意一种或多种;更优选地,所述抗羟苯磺酸钙干扰试剂单独存在于R1试剂或R2试剂中,或同时存在于R1试剂和R2试剂中。
6.根据权利要求5所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述结合羟苯磺酸钙的核酸适配体在R1试剂或R2试剂中的浓度为1nmol/L~100nmol/L,优选为5nmol/L~20nmol/L。
7.根据权利要求2所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂,所述R1试剂包括肌氨酸氧化酶、肌酸眯基水解酶、选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3任一项所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体和所述过氧化氢酶,所述R2试剂包括肌酐酶、4-AA、过氧化物酶和和如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体;
或者,所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂,所述R1试剂包括肌氨酸氧化酶、肌酸眯基水解酶和所述过氧化氢酶,所述R2试剂包括肌酐酶、4-AA、过氧化物酶和和如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体和选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3任一项所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体;
或者,所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂,所述R1试剂包括肌氨酸氧化酶、肌酸眯基水解酶、选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3任一项所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体和所述过氧化氢酶和所述过氧化氢酶,所述R2试剂包括肌酐酶、4-AA、过氧化物酶和如权利要求1所述的结合过氧化氢酶的核酸适配体和选自如SEQ ID NO.1、SEQ IDNO.2或SEQ ID NO.3任一项所示序列的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体。
8.根据权利要求2~7任一项所述的肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括防腐剂、表面活性剂、核酸酶抑制剂及抗坏血酸氧化酶中的任意一种或多种。
9.一种非诊断目的的肌酐检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、将含有肌氨酸氧化酶、肌酸眯基水解酶和过氧化氢酶的试剂与检测样品进行反应,使检测样品中的内源性肌酸转化为不可被肌酐酶催化的物质,并将产生的H2O2分解;
b、将含有肌酐酶和过氧化氢酶抑制剂的试剂与步骤a得到的检测样品混合物进行反应,所述过氧化氢酶抑制剂选自如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示序列的结合过氧化氢酶的核酸适配体中的任意一种或多种;
c、对步骤b得到的H2O2进行定量检测。
10.根据权利要求9所述的非诊断目的的肌酐检测方法,其特征在于,还包括:在步骤a和/或步骤b的反应物中加入选自如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的任意一种或多种的结合羟苯磺酸钙的核酸适配体。
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