[发明专利]制备细胞基片的方法、制备试剂盒的方法及联检方法在审
申请号: | 202110959655.1 | 申请日: | 2021-08-20 |
公开(公告)号: | CN113804522A | 公开(公告)日: | 2021-12-17 |
发明(设计)人: | 张秀杰;吴吟妮;张晓刚;刘洋;刘雪敏 | 申请(专利权)人: | 北京英诺特生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 北京毕科锐森知识产权代理事务所(普通合伙) 11877 | 代理人: | 王家毅;王璐璐 |
地址: | 100070 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 细胞 方法 试剂盒 联检 | ||
本发明公开了一种制备用于多病原体联检的细胞基片的方法、制备用于多病原体联检的试剂盒的方法及多病原体的联检方法,属于免疫检测领域。制备用于多病原体联检的细胞基片的方法包括以下步骤:将多种病原体分别进行细胞传代培养;将至少两种传代细胞分别制成细胞悬液;将细胞悬液分别施加于同一载玻片上不同载玻片孔中,待细胞吸附后在相同条件下固定不同载玻片孔中的细胞;多种病原体包括从呼吸系统感染病原体、血液系统感染病原体、消化系统感染病原体和生殖系统感染病原体中选择任意一种病原体中至少两种病原微生物,相同的条件为在相同温度条件下使用无水乙醇固定相同时间,之后在湿度小于50%的同一湿度环境下干燥相同时间形成细胞基片。
技术领域
本发明涉及免疫检测技术领域,特别涉及制备用于多病原体联检的细胞基片的方法、制备用于多病原体联检的试剂盒的方法及多病原体的联检方法。
背景技术
通常大多数感染都是通过病毒、细菌、支原体、衣原体等病原体所引起,在治疗时必须明确引起感染的病原体是何种类型,这是进行有效治疗的前提。而由于同一种类的病原体可以引起多种临床症状,而同一临床表现却有可能是由于多种病原体引起的,在例如呼吸系统感染患者中,复合感染的比例大约占据20%,而单一的病毒或者细菌等病原体的检测已不能满足临床诊断需求。
因此,对不同类型的病原体联检尤为必要。特别是在临床应用中,常常因为检测不同项目,而需要采集患者多管样本或者采集患者不同部位的样本类型,通过这样的检测才能基本满足临床诊断的需要。这样不仅仅增加了检测的时间和成本,而且对于患者本身的就诊体验度也非常差。
目前,常用实验室病原体的检测方法主要有分离培养法、抗原的测定、特异性抗体检测和分子生物学法。其中分离培养法具有耗费时间较长、敏感性低且对技术要求高的缺点;在抗原的测定中虽然能够明确感染证据、实现快速检测,但是其敏感性太低;而在特异性抗体的检测中特异性高和灵敏度低,导致不能及时辅助临床诊断,进而使得患者不能及时得到有效治疗;分子生物学的方法虽然具有敏感性高、检测快速的优点,但由于对实验环境要求高非常不利于推广。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述问题和缺陷的至少一个方面,本发明提供了一种用于多病原体联检的间接免疫荧光检测试剂盒。所述技术方案如下:
本发明的一个目的是提供了一种制备用于多病原体联检的细胞基片的方法。
本发明的另一目的是提供了一种制备用于多病原体联检的试剂盒的方法。
本发明的还一目的是提供了一种多病原体的联检方法。
根据本发明的一个方面,提供了一种制备用于多病原体联检的细胞基片的方法,所述方法包括以下步骤:
步骤S1将多种病原体分别进行细胞传代培养;
步骤S2将多种病原体中的至少两种传代细胞分别制成细胞悬液;
步骤S3将制成的细胞悬液分别施加于同一载玻片上的不同载玻孔中,待所述不同载玻片孔中的细胞悬液中的细胞均吸附后,在相同的条件下固定所述不同载玻片孔中的细胞;
所述多种病原体包括从呼吸系统感染病原体、消化系统感染病原体和生殖系统感染病原体中选择的任意一种病原体中的至少两种病原微生物,
在步骤S3中,所述相同的条件为在相同的温度条件下使用无水乙醇固定相同的时间,之后在湿度小于50%的同一湿度环境下干燥相同的时间形成所述细胞基片。
具体地,所述相同的温度条件为环境温度选自范围23℃~27℃之间的同一温度,所述固定相同的时间是固定时间选自范围30min~3h之间的同一时间,所述干燥相同的时间是干燥时间选自范围30min~3h之间的同一时间。
优选地,所述相同的温度条件是25℃,所述固定相同的时间是1h,所述干燥相同的时间是2h,所述无水乙醇为-20℃无水乙醇,
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