[发明专利]一种去除血浆中儿茶酚胺及其中间代谢物的方法及应用有效
申请号: | 202110956832.0 | 申请日: | 2021-08-19 |
公开(公告)号: | CN113820437B | 公开(公告)日: | 2023-08-11 |
发明(设计)人: | 李姝妹;翟立斐;戴辉;徐忠斌;周建营;谢晓磊;张东丽;施燕萍;张璐 | 申请(专利权)人: | 上海睿质科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/88 |
代理公司: | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人: | 李佳俊;郭国中 |
地址: | 201100 上海市闵行*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 去除 血浆 儿茶酚胺 及其 中间 代谢物 方法 应用 | ||
1.一种去除儿茶酚胺及其中间代谢物的空白血浆基质的制备方法,其特征在于:将血浆样品通过固相萃取、吸附和超滤处理后,获得空白血浆基质;
将血浆样品先进行固相萃取,再进行吸附处理,离心后收集上清液,将上清液进行超滤处理,获得空白血浆基质;
所述空白血浆基质的制备方法包括如下步骤:
S1、用甲醇和水对官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱进行活化,弃去收集液;
S2、取5-6 mL血浆样品,装入所述官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱,收集流出液,获得经固相萃取的空白血浆基质粗提液;
S3、在离心管中加入4-6 mL超纯水、0.1-0.2g活性炭、0.01-0.02g葡聚糖,震荡,15000-20000rpm离心5-10 min,弃去上清,留下葡聚糖包覆的活性炭,沥干备用;
S4、将步骤S2获得的空白血浆基质粗提液加入到步骤S3制备的沥干的葡聚糖包覆的活性炭中,震荡,离心15000-20000rpm, 5-10 min,取上清液,加入到沥干的葡聚糖包覆的活性炭中,震荡,进一步离心15000-20000rpm, 5-10 min,收集上清液,获得空白血浆基质初液;
S5、步骤S4制得的空白血浆基质初液进一步置于3 KD超滤管中,10000-14000 rpm离心15-20 min,弃去滤出液;在超滤管中,上清液中加入300-400 μL超纯水,混合均匀,10000-14000 rpm再次离心15-20 min;弃去滤出液,重复上述步骤数次,之后用超纯水定容至初始体积。
2.采用权利要求1所述方法制备获得的空白血浆基质。
3.根据权利要求1所述方法制备获得的空白血浆基质在对血浆样品进行儿茶酚胺及其中间代谢物的靶标检测中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述儿茶酚胺及其中间代谢物靶标包括肾上腺素E、去甲肾上腺素NE、甲氧基肾上腺素MN、多巴胺DA、甲氧基去甲肾上腺素NMN、3甲氧基酪胺3-MT中的一种或一种以上。
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