[发明专利]一种口服重组幽门螺杆菌蛋白疫苗纳米粒及其制备方法

说明书

本发明属于药物制剂领域。本发明涉及重组蛋白疫苗α1,3‑岩藻糖基转移酶纳米粒及其制备方法。本发明制备得到的重组蛋白疫苗α1,3‑岩藻糖基转移酶纳米粒，不仅能提高α1,3‑岩藻糖基转移酶在体肠吸收，还能提高巨噬细胞摄取α1,3‑岩藻糖基转移酶的能力，可用于预防和治疗幽门螺旋杆菌引起的感染。

技术领域

本发明属于医药制剂领域，涉及一种口服重组幽门螺杆菌蛋白疫苗纳米粒及其制备方法。

背景技术

幽门螺杆菌感染可引起胃十二指肠疾病，疫苗作为预防和治疗方法在全世界范围内被广泛采用，但疫苗常需采用注射给药，患者依从性较差，口服是患者最具依从性的给药途径。重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶可帮助幽门螺杆菌逃避宿主免疫监视，在幽门螺杆菌的定植和长期感染中起重要作用，但存在渗透性差，难以被肠道吸收，难以被淋巴组织中的抗原呈递细胞(巨噬细胞等)摄取等缺点，限制了该药在临床上的广泛应用。

疫苗纳米粒较疫苗常规剂型具有优势。本发明涉及的辅料聚酯材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物是由乳酸和羟基乙酸聚合而成的高分子化合物，具有良好的可降解性，作为载体可以负载抗原引起粘膜免疫反应。羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯作为肠溶材料包裹蛋白质药物有利于帮助疫苗克服恶劣的胃肠道环境。2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可打开上皮细胞紧密连接，帮助抗原穿过上皮层，同时具有疫苗佐剂功能。本发明研究过程中，将卵白蛋白作为模型抗原，是因为卵白蛋白的分子量和等电点(43kDa、4.71)与α1,3-岩藻糖基转移酶的分子量和等电点相似(分别为53kDa、5.25)。

经查询专利及文献，目前尚无口服重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶纳米粒的任何研究报道。本发明的纳米粒不仅能提高α1,3-岩藻糖基转移酶和模型抗原的在体肠吸收，还能提高巨噬细胞摄取α1,3-岩藻糖基转移酶和模型抗原的能力。本发明制备了口服重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶纳米粒，可用于预防和治疗幽门螺旋杆菌引起的感染。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供口服重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶纳米粒配方及其制备方法。口服重组蛋白疫苗α1,3岩藻糖基转移酶纳米粒克服了α1,3-岩藻糖基转移酶渗透性差、在肠道吸收差、难以被淋巴组织中的抗原呈递细胞(巨噬细胞等)摄取等缺点，本发明的纳米粒不仅能提高α1,3-岩藻糖基转移酶和模型抗原的在体肠吸收，还能提高巨噬细胞摄取α1,3-岩藻糖基转移酶和模型抗原的能力。

本发明提供的口服重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶纳米粒，其特征在于，制剂中α1,3-岩藻糖基转移酶的含量为1.2-6.0mg/mL，制剂中其余组分重量比为：聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.2-0.8份，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯0.1-0.4份，2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖0.01-0.04份，乳化剂0.3-1.2份，蒸馏水50-100份。本发明提供的口服重组蛋白疫苗α1,3-岩藻糖基转移酶纳米粒，制备过程包括如下步骤：(1)将处方量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物和羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯溶于二氯甲烷或丙酮或三氯甲烷中的一种或两种或叁种的混合物形成溶液A，将处方量的α1,3-岩藻糖基转移酶溶于蒸馏水后，加入溶液A中，混合，在冰浴中超声后得乳状液B；(2)将处方量的乳化剂溶于蒸馏水中，将处方量的2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖溶于蒸馏水中，迅速将乳状液B放入冰浴中，再缓慢加入上述乳化剂水溶液和2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖水溶液，在冰浴中超声后得乳状液C；(3)将乳状液C搅拌18-36小时挥发除掉有机溶剂，即得口服重组幽门螺杆菌蛋白疫苗纳米粒。