[发明专利]一种注射用水包油型乳剂黏膜疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，含有油相、水相、乳化剂、全反式维甲酸、金属离子化合物和抗原，所述注射用水包油型乳剂黏膜疫苗的制备方法，包括以下步骤：

(1)将全反式维甲酸和亲油性乳化剂溶于油相中，亲水性乳化剂溶于水相中，将二者通过超声、均质高速搅拌或微流控方法充分混匀后形成初乳；

(2)将全反式维甲酸溶解在有机溶剂中，所述有机溶剂为可溶解全反式维甲酸且易旋转蒸发去除的溶剂，旋转蒸发除去有机溶剂得到薄膜；

(3)将pH缓冲液加到步骤(1)所得的初乳中；

(4)将步骤(3)制得的混合物加入步骤(2)所得薄膜中；

(5)将金属离子化合物加入到步骤(4)制得的混合物中；

(6)将抗原加入到步骤(5)制得的混合物中，混合均匀即得；

其中金属离子化合物吸附于初乳表面，全反式维甲酸溶解在制备初乳的油相中以及存在于除去有机溶剂得到的薄膜再分散在含pH缓冲液的初乳中，所述的金属离子化合物为可溶性的无机盐，所述无机盐的阳离子为铝，所述无机盐的阴离子为磷酸根离子、磷酸氢根离子、磷酸二氢根离子、硫酸根离子、氯离子或氢氧根离子，抗原通过金属离子化合物吸附于初乳表面。

2.根据权利要求1所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述注射用水包油型乳剂黏膜疫苗中组分的质量比为：全反式维甲酸0.01％-10％，油相0.05％-50％，乳化剂0.005％-10％，金属离子化合物0.01％-10％，抗原0.0001％-8％。

3.根据权利要求2所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述全反式维甲酸、抗原与金属离子化合物的质量比为(0.05-4):(0.01-6):1。

4.根据权利要求1所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述注射用水包油型乳剂黏膜疫苗的平均粒径为10nm-2000nm。

5.根据权利要求4所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述注射用水包油型乳剂黏膜疫苗的平均粒径为50nm-200nm。

6.根据权利要求1所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述金属离子化合物为氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝、硫酸铝的任意一种或至少两种的组合。

7.根据权利要求1-6任一所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述油相为任何医药上可应用的油。

8.根据权利要求1所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷、己烷、环己烷、乙腈、四氢呋喃、乙醚、乙酸乙酯中的任意一种或至少两种的组合。

9.根据权利要求8所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇。

10.根据权利要求1-6任一所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述抗原为蛋白、多肽、氨基酸衍生物、核酸、寡糖、多糖、肿瘤细胞膜、肿瘤细胞裂解液、病毒或细菌裂解物、细菌细胞膜、支原体细胞膜、衣原体细胞壁、螺旋体、立克次体微荚膜、病毒包膜外泌体、细菌外膜囊泡中的任意一种或至少两种的组合。

11.根据权利要求1-6任一所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述注射用水包油型乳剂疫苗含有佐剂，所述佐剂为Toll样受体9激动剂CpG1826，所述佐剂包载在乳剂中或吸附在乳剂表面，所述佐剂的质量百分比为0.01％-10％。

12.根据权利要求1所述的注射用水包油型乳剂黏膜疫苗，其特征在于，所述pH缓冲液为氯化钠溶液、柠檬酸钠缓冲液、磷酸盐缓冲液、Hepes缓冲液或Tris缓冲液中的任意一种或者至少两种的组合。