[发明专利]一种从发酵液中分离提取胞苷的方法在审
申请号: | 202110942265.3 | 申请日: | 2021-08-17 |
公开(公告)号: | CN113621010A | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | 应汉杰;陈勇;温庆仕;魏荷芬;周精卫;杨玉晨 | 申请(专利权)人: | 南京高新工大生物技术研究院有限公司;南京工业大学 |
主分类号: | C07H19/06 | 分类号: | C07H19/06;C07H1/06 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 仲凌霞;肖明芳 |
地址: | 210032 江苏省南京市江北新区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 分离 提取 方法 | ||
1.一种分离提取胞苷的方法,其特征在于,将含有胞苷的液体经阳离子交换树脂吸附洗脱,所得洗脱液浓缩结晶,即得胞苷晶体;
其中,所述阳离子交换树脂为NH-1树脂经硫酸银和/或硫酸改性所得;所述阳离子交换树脂的吸附量为0.2-0.4g/g。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述硫酸银的用量为NH-1树脂质量的2%-8%;所述硫酸的用量为树脂的体积的10-20倍。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,改性过程中的溶剂为二氯乙烷和/或三氯乙烷;所述NH-1树脂与溶剂的体积比为1:(6-20)。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将NH-1树脂与溶剂混合,于50-70℃下保持0.5-2h;加入硫酸银和/或硫酸,于70-90℃下保持2-4h,再于90-100℃下保持2-3h,过滤、洗涤,即得。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)胞苷发酵液经陶瓷膜过滤,得到第一透过液;
(2)步骤(1)所得第一透过液经阳离子交换树脂吸附,水和/或氨水洗杂、氨水洗脱,得到洗脱液;
(3)步骤(2)所得洗脱液经纳滤膜纳滤,得到第二透过液;
(4)步骤(3)所得第二透过液经纳滤膜浓缩、调节pH、搅拌降温析晶,得到胞苷晶体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述洗杂过程中,氨水的浓度为0-0.05mol/L;所述洗脱过程中,氨水的浓度为0.05-0.1mol/L。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述纳滤膜的截留分子量为300-800Da。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述纳滤膜的截留分子量为60-200Da。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述浓缩为浓缩至400-800g/L。
10.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述pH为5-10;所述降温为降温至0-10℃。
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