[发明专利]一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法

说明书

本发明公开了一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，属于硫酸软骨素制备技术领域，包括如下步骤：(1)原料预处理、(2)一次滤液制备、(3)浸提液制备、(4)一次酸处理过滤液制备、(5)第一酶解液制备、(6)第二酶解液制备、(7)二次酸处理过滤液制备、(8)沉淀料制备、(9)沉淀料再处理、(10)成品制备。本发明方法具有产品纯度高、产率高、成本低的特点，并解决了原料供应量不足的问题，为猪肺废弃资源提供有效利用途径，此外还具有工艺绿色环保、对环境污染小的优势。

技术领域

本发明属于硫酸软骨素制备技术领域，特别是一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法。

背景技术

硫酸软骨素是广泛存在于人和动物软骨组织中的一类酸性黏多糖物质，可用于治疗关节炎和冠心病，且具有调脂、降脂、抗凝、抗肿瘤等作用。目前，国内外硫酸软骨素的提取多利用动物提取法进行制备，原料多来自鱼软骨、鸡胸软骨、牛或羊鼻骨、猪软骨、喉骨、蛋壳膜等。碱提取法和酶解法为目前较常用的提取方法。硫酸软骨素的分离纯化，多采用溶剂分级沉淀法、季铵盐法、超滤膜法、色谱法、电泳法、离子交换、超滤-离子层析法等。

尽管我国硫酸软骨素产业发展强劲，但仍然面临原料难以实现集中大规模的收购、产业水平不高(工艺繁琐、收率不高、质量不稳)、产品质量缺陷、污染严重(产生大量的有机物和蛋白废水)等制约产业发展的关键瓶颈。因此，如何发展原料丰富、技术先进、质量优异、清洁环保的生产工艺是促进硫酸软骨素产业发展的关键。

具体如现有常用的碱提-酶提取技术，步骤是：①用15％氢氧化钠溶液处理软骨；②加入胰蛋白酶，得到酶解液；③调节pH，去除杂蛋白；④双氧水脱色处理：双氧水脱色：滤液滴加1％双氧水数滴，搅拌脱色4h，过滤；⑤乙醇沉淀、干燥，得到硫酸软骨素粗品。此方式的缺点是：得率低、纯度低、使硫酸软骨素发生降解，污染严重。

发明内容

本发明的目的是提供一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，以解决现有技术中的不足。

本发明采用的技术方案如下：

一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，包括如下步骤：

(1)将猪气管除杂洗净，去除附着的组织及油脂，至洁白，再晾干粉碎备用；

(2)将步骤(1)处理后的猪气管粉末与氢氧化钠溶液混合，浸提处理12h后过滤，得一次滤液和一次滤渣备用；

(3)对步骤(2)所得的一次滤渣再次按照步骤(2)的方式进行浸提一次，完成后过滤得二次滤液和二次滤渣，最后将一次滤液和二次滤液混合均匀，得浸提液备用；

(4)用盐酸对步骤(3)所得的浸提液酸碱度进行调节，然后水浴加热至60℃，搅拌处理20min，再静置10min后过滤，得一次酸处理过滤液备用；

(5)向步骤(4)所得的酸处理过滤液中加入有机缓冲液甘氨酸-氢氧化钠溶液和胰蛋白酶，并于37℃、pH值为8的条件下反应处理2h，完成后得第一酶解液备用；

(6)向步骤(5)所得的第一酶解液中加入软骨素专用酶，并于40℃、pH值为8.5的条件下反应处理2h，完成后得第二酶解液备用；

(7)用盐酸将步骤(6)所得的第二酶解液的pH值调至6.5-7，搅拌处理20min，再静置10min，过滤，得二次酸处理过滤液备用；

(8)向步骤(7)所得的二次酸处理过滤液中加入氯化钠，充分溶解后，再将溶液的pH值调至6，随后再将其冷冻至-10～-5℃,边搅拌边加入丙酮，并于-5～0℃条件下保温24-30h，弃去上清液后得沉淀料备用；

(9)向步骤(8)所得的沉淀料中加入无水乙醇，静置6h后去除上清液；