[发明专利]一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将猪气管除杂洗净，去除附着的组织及油脂，至洁白，再晾干粉碎备用；

(2)将步骤(1)处理后的猪气管粉末与氢氧化钠溶液混合，浸提处理12h后过滤，得一次滤液和一次滤渣备用；

(3)对步骤(2)所得的一次滤渣再次按照步骤(2)的方式进行浸提一次，完成后过滤得二次滤液和二次滤渣，最后将一次滤液和二次滤液混合均匀，得浸提液备用；

(4)用盐酸对步骤(3)所得的浸提液酸碱度进行调节，然后水浴加热至60℃，搅拌处理20min，再静置10min后过滤，得一次酸处理过滤液备用；

(5)向步骤(4)所得的酸处理过滤液中加入有机缓冲液甘氨酸-氢氧化钠溶液和胰蛋白酶，并于37℃、pH值为8的条件下反应处理2h，完成后得第一酶解液备用；

(6)向步骤(5)所得的第一酶解液中加入软骨素专用酶，并于40℃、pH值为8.5的条件下反应处理2h，完成后得第二酶解液备用；

(7)用盐酸将步骤(6)所得的第二酶解液的pH值调至6.5-7，搅拌处理20min，再静置10min，过滤，得二次酸处理过滤液备用；

(8)向步骤(7)所得的二次酸处理过滤液中加入氯化钠，充分溶解后，再将溶液的pH值调至6，随后再将其冷冻至-10～-5℃,边搅拌边加入丙酮，并于-5～0℃条件下保温24-30h，弃去上清液后得沉淀料备用；

(9)向步骤(8)所得的沉淀料中加入无水乙醇，静置6h后去除上清液；

(10)向步骤(9)处理后的沉淀料中加入氯化钠溶液，充分溶解后，再加入无水乙醇，静置6h后离心，除去上清液后，再于60～65℃条件下进行干燥，完成后即得成品。

2.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的氢氧化钠溶液的质量分数为3％；所述氢氧化钠溶液的加入量是猪气管粉末体积的6倍；所述浸提处理时控制温度为30℃。

3.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的盐酸的浓度为2mol/l。

4.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(5)中所述的有机缓冲液甘氨酸-氢氧化钠溶液的加入量是酸处理过滤液总体积的0.1-0.2％；所述胰蛋白酶的加入量是酸处理过滤液中所含猪气管粉末总质量的0.5％。

5.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(6)中所述的软骨素专用酶是由胰酶和软骨水解专用蛋白酶对应按照重量比1：2混合而成；所述软骨素专用酶的加入量是第一酶解液中所含猪气管粉末总质量的1％。

6.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(8)中所述的氯化钠的加入量是二次酸处理过滤液总质量的1.5％。

7.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(9)中所述的无水乙醇的加入量是沉淀料总质量的3倍。

8.根据权利要求1所述的一种从猪气管中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于，步骤(10)中所述的氯化钠溶液的质量分数为1.5％；所述无水乙醇的加入量是物料总质量的3倍。