[发明专利]一种苦瓜外泌体、提取方法及在制备治疗烧烫伤皮肤药物中的应用有效
| 申请号: | 202110929735.2 | 申请日: | 2021-08-13 |
| 公开(公告)号: | CN113462632B | 公开(公告)日: | 2023-08-29 |
| 发明(设计)人: | 齐素华;郭新建;王彦玲;印晓星 | 申请(专利权)人: | 徐州医科大学 |
| 主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A61K36/42;A61P17/02 |
| 代理公司: | 徐州拉沃智佳知识产权代理有限公司 32455 | 代理人: | 陈永宁 |
| 地址: | 221004 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 苦瓜 外泌体 提取 方法 制备 治疗 烫伤 皮肤 药物 中的 应用 | ||
1.苦瓜外泌体在制备治疗皮肤深Ⅱ度烫伤药物中的应用,其特征在于,所述苦瓜外泌体通过以下步骤提取:
S1、取适量克数的新鲜云南山野苦瓜,摘除根茎,用自来水洗三遍后再用蒸馏水洗三遍,每遍2-3min,待水分干后,切开去籽,榨汁;
S2、将榨出的苦瓜汁连续离心,于4℃,1000g,10 min;3000 g,20 min;10000 g,40min;离心后取上清,弃沉淀,将上清液继续进行超速离心,于超速冰冻离心机4℃,150000g,离心90 min,离心后弃上清,得沉淀悬液;
S3、在离心管中依梯度加好蔗糖溶液,在最上层加入步骤S2所得沉淀悬液,然后于150000g下超速离心120min;
S4、离心结束后分别收集分层置入清洗后的离心管中,加入冰PBS溶液后混合均匀,于超速冷冻离心机中,150000 g,离心90 min,用1-3mL PBS溶液重悬沉淀后用滤膜过滤,取滤液分装。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤S3中蔗糖浓度梯度为:8%、30%、45%、60%。
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