[发明专利]一种热稳定核酸疫苗佐剂及其制备方法

权利要求书

1.一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，包括以下重量份原料：25.8-31.2份油相、50-60份水相、3.5-4.6份改性微球和0.5-1.1份无机填料；

改性微球由以下步骤制成：

步骤A1、将聚乙烯亚胺、乙腈和三乙胺混合，加入六氯环三磷腈的乙腈溶液和壳聚糖的醋酸溶液，密封，40℃下超声反应8h，离心，洗涤，干燥，得到复合微球；

步骤A2、将DMF置于三口烧瓶中，冰浴下，滴加氯磺酸，边滴加边搅拌，反应体系温度保持0-5℃，滴加结束后，室温下搅拌至澄清，得到处理剂；

步骤A3、将复合微球和无水乙醇超声分散后，滴加处理剂，微波辐射反应1min，于4℃冰箱中沉淀30min后取出，洗涤后加入氢氧化钠溶液调节pH值为7-8，透析，冷冻干燥，得到改性微球。

2.根据权利要求1所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，步骤A1中六氯环三磷腈的乙腈溶液由六氯环三磷腈和乙腈按照0.1g：20mL混合而成，壳聚糖的醋酸溶液由壳聚糖和质量分数6-8％醋酸溶液按照0.1g：20mL混合而成。

3.根据权利要求1所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，步骤A2中DMF和氯磺酸的体积比为5：1。

4.根据权利要求1所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，步骤A3中复合微球、无水乙醇、处理剂的用量比为50mg：100mL：8.5-9.1mg。

5.根据权利要求1所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，所述无机填料由以下步骤制成：

氮气保护下，将介孔二氧化硅、2，3-环氧丙基三甲基氯化铵和二甲基亚砜混合，温度50-60℃，搅拌反应10min，加入氢氧化钾，升温至180-185℃，搅拌回流反应3-5h，离心，洗涤，干燥，得到无机填料。

6.根据权利要求5所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，介孔二氧化硅由以下步骤制成：

将三乙胺、十六烷基三甲基氯化铵和去离子水超声分散，升温至60℃，搅拌反应1h，滴加氯苯，滴加结束后搅拌20min，滴加正硅酸乙酯，保温搅拌反应12h，离心，洗涤，煅烧后冷却，得到介孔二氧化硅。

7.根据权利要求5所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，介孔二氧化硅、2，3-环氧丙基三甲基氯化铵、二甲基亚砜和氢氧化钾的用量比为0.5-0.8g：0.2-0.4g：25.8-26.4mL：0.5g。

8.根据权利要求6所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂，其特征在于，三乙胺、十六烷基三甲基氯化铵、去离子水、氯苯和正硅酸乙酯的用量比为0.18g：2.7-3.3g：36-40mL：2.6-4.1mL：1mL。

9.根据权利要求1所述的一种热稳定核酸疫苗佐剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：

将无机填料和水相混合，频率40-60kHz下超声分散后，加入油相和改性微球，继续超声处理20min，即得一种热稳定核酸疫苗佐剂。