[发明专利]检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的KASP引物及其应用

权利要求书

1.检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的KASP引物，其特征在于所述的KASP引物序列包含：

正向引物zym-86-FT：5’-GCAATTACGCAAAAGCCTT-3’，其序列如SEQNo.1；

正向引物zym-86-FC：5’-GCAATTACGCAAAAGCCTC-3’，其序列如SEQNo.2；

反向引物zym-99-RC：5’-TTGAAGTACTCCAAGGCGTTC-3’，其序列如SEQ No.3；

反向引物zym-99-RT：5’-TTGAAGTACTCCAAGGCGTTT-3’，其序列如SEQ No.4；

所述正向引物zym-86-FT和正向引物zym-86-FC分别与不同的标签序列相连接；

所述反向引物zym-99-RC和反向引物zym-99-RT分别与不同的标签序列相连接。

2.根据权利要求1所述的检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的KASP引物，其特征在于合成所述的正向引物zym-86-FT和反向引物zym-99-RC时，在两者5’端加上序列为：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’的标签序列A，其序列如SEQ No.5；合成所述正向引物zym-86-FC和反向引物zym-99-RT时，在两者5’端加上序列为：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’的标签序列B，其序列如SEQ No.6。

3.根据权利要求1所述的检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的KASP引物，其特征在于所述的KASP引物序列为：

正向引物86-FT：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGCAATTACGCAAAAGCCTT-3’，其序列如SEQNo.7；

正向引物86-FC：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGCAATTACGCAAAAGCCTC-3’，其序列如SEQNo.8；

反向引物99-RC：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCTTTGAAGTACTCCAAGGCGTTC-3’，其序列如SEQ No.9；

反向引物99-RT：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTTTGAAGTACTCCAAGGCGTTT-3’，其序列如SEQ No.10。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的KASP引物，其特征在于所述的KASP引物中还包括：

反向引物86-R：5’-CTTGGGATTTTTCTCATACTTCA-3’，其序列如SEQNo.11；

正向引物99-F：5’-CTATTGAATACGTGAAGCAGGC-3’，其序列如SEQ No.12。

5.用于检测黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym的试剂盒，其特征在于包含权利要求1-4中任一项所述的KASP引物，其中正向引物86-FT、正向引物86-FC和反向引物86-R为一对KASP引物；反向引物99-RC、反向引物99-RT和正向引物99-F为一对KASP引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于其中还包含：

标签序列A：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’，其序列如SEQ No.5；

标签序列B：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’，其序列如SEQ No.6；

所述两种标签序列：标签序列A和标签序列B，分别与不同的荧光基团相连接，其特征在于标签序列A与FAM荧光基因相连接，标签序列B与HEX荧光基因相连接；

所述两种标签序列的互补序列均与BHQ淬灭基因相连接。

7.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求要求5-6任一项所述的试剂盒在鉴定黄瓜小西葫芦黄化花叶病毒病抗病基因zym中的应用。