[发明专利]一种抗人CD47蛋白的抗体、检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种抗人CD47蛋白的抗体、检测试剂盒及其应用，涉及抗体技术领域。该抗体可以特异性地结合人CD47蛋白，对人CD47蛋白具有较高的亲和力，该抗体与CD47蛋白具有较高的结合特异性和灵敏度。本发明为解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用提供了更为丰富的抗体选择，以期重新恢复机体免疫细胞功能，达到抑制肿瘤生长的效果。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种抗人CD47蛋白的抗体、检测试剂盒及其应用。

背景技术

肿瘤是全球第二大导致人类死亡的病因。无论在发达国家还是在发展中国家，肿瘤导致的癌症都是死亡率最高的疾病，并且其死亡率和发病率仍不断增高。全球癌症疾病报告显示：过去十年里，全球癌症发病率升高了33％。仅2015年，就有1520万人被诊断为癌症，并有880万人因此死亡；而发展中国家的癌症死亡率高于发达国家，患病人数占到全球的57％，死亡人数高达全球的65％，因此抗肿瘤药物市场的潜力十分巨大。

几乎所有的肿瘤细胞都具有通过提高自身CD47蛋白表达，不但使其周围多种免疫细胞正常免疫杀伤功能受到抑制，而且表现出促进肿瘤组织扩增和转移的特性，这种特性能够导致患者病情进一步恶化。相关研究表明，阻断肿瘤细胞CD47相关的信号通路，能够解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用，从而激活肿瘤微环境中免疫细胞，尤其是巨噬细胞的杀伤功能，杀伤肿瘤细胞；活化的巨噬细胞通过吞噬靶细胞，发挥其抗原提呈的功能，特异性的活化T细胞，通过活化的T细胞发挥的细胞毒作用，进一步杀伤肿瘤细胞。

利用抗体结合细胞表面蛋白靶点治疗多种肿瘤和类风湿等免疫疾病已取得显著的效果；截至目前，经FDA批准上市的相关药物已超过60种。相关研究已经证明，利用抗CD47单克隆抗体，在体内特异性结合肿瘤细胞表面高表达的CD47蛋白，能够有效解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用，重新恢复机体免疫细胞功能，达到抑制肿瘤生长的效果。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗人CD47蛋白的抗体、检测试剂盒及其应用，该抗体可以特异性地结合人CD47蛋白，对人CD47蛋白具有较高的亲和力，该抗体与CD47蛋白具有较高的结合特异性和灵敏度。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种抗人CD47蛋白的抗体或其功能性片段，抗体或其功能性片段包括互补决定区CDR-VH1、互补决定区CDR-VH2、互补决定区CDR-VH3、互补决定区CDR-VL1、互补决定区CDR-VL2和互补决定区CDR-VL3；

互补决定区CDR-VH1为DYYIN；

互补决定区CDR-VH2为DINPGRGKTYYIEKFKG；

互补决定区CDR-VH3为GGLRRFDY；

互补决定区CDR-VL1为RASSSVSSSYLH；

互补决定区CDR-VL2为STSTLAS；

互补决定区CDR-VL3为QQYSGYPYT。

发明人发现：具有上述互补决定区结构的抗体或其功能性片段，可以使得抗体或其功能性片段能够特异性结合抗人CD47蛋白，对其具有较好的亲和力，该抗体或其功能性片段能特异性识别人族分化抗原47(CD47)，能够作为免疫活化物刺激机体的免疫反应，有可能产生抗肿瘤等疾病的效果。本发明为解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用提供了更为丰富的抗体选择，以期重新恢复机体免疫细胞功能，达到抑制肿瘤生长的效果。

在本发明应用较佳的实施方式中，上述抗体包括序列依次如SEQ ID NO:1-4所示或其具有至少80％同源性的轻链骨架区FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L，和/或，序列依次如SEQ ID NO:5-8或其具有至少80％同源性所示的重链骨架区FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H。