[发明专利]一种超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记及应用在审
申请号: | 202110909368.X | 申请日: | 2021-08-09 |
公开(公告)号: | CN113736895A | 公开(公告)日: | 2021-12-03 |
发明(设计)人: | 阮思煜;李云亮;马海乐;纪耀勇;周安奇;谢鹏飞;赵博博;刘晓霜;徐雅宣;吴燕伶 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6858;C12Q1/02;C12N15/11;C12R1/42 |
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地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 超声 诱变 伤寒 沙门氏菌 hisd 基因 indel 分子 标记 应用 | ||
1. 一种超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记,其特征在于,所述InDel分子标记为鼠伤寒沙门氏菌hisD基因第832位碱基到第915位碱基,其核苷酸序列如SEQ IDNO. 4所示。
2.权利要求1所述的超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记由如下特异性分子标记引物扩增得到,其特征在于,所述引物序列为:
hisDRC(F):5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3';
hisDRC(R):5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
3.一种用于检测权利要求1所述的超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记的引物,所述引物的核苷酸序列为:
hisDRC(F):5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3';
hisDRC(R):5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
4.权利要求1所述的超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记在基因回复突变插入或者缺失的判定中的应用。
5.权利要求1所述的超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记在分析hisD基因序列与其所编码蛋白质功能的关系中的应用。
6.一种的检测hisD基因寡核苷酸插入或缺失的方法,其特征在于,通过采用权利要求3所述的特异性引物扩增分子标记部分,所述引物的核苷酸序列为:
hisDRC(F):5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3';
hisDRC(R):5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
7.根据权利要求6所述的检测hisD基因InDel核心突变区的寡核苷酸插入或缺失的方法,其特征在于,所述方法为以组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌hisD基因的DNA扩增产物为对照,通过PAGE电泳分析,如果两者扩增条带有大小差异,则发生了寡核苷酸插入或缺失回复突变。
8.根据权利要求7所述的检测hisD基因InDel核心突变区的寡核苷酸插入或缺失的方法,其特征在于,所述方法中,可以将扩增产物经测序分析其具体的插入或缺失寡核苷酸序列。
9.权利要求6~8任一项所述的检测方法在脉冲电场、分秒激光等物理场诱变鼠伤寒沙门氏菌回复突变检测中的应用。
10.一种用于检测权利要求1所述的超声诱变的鼠伤寒沙门氏菌hisD基因InDel分子标记的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有用于权利要求3所述检测分子标记的引物。
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