[发明专利]一种雄激素受体小分子荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种雄激素受体小分子荧光探针及其制备方法和应用，所述小分子荧光探针的结构式如下式(I)所示。本发明所述雄激素受体小分子荧光探针具有荧光特性，对雄激素受体有较好的特异性结合。该化合物作为荧光偏振探针，通过竞争性结合的方法，可以实现对雄激素受体拮抗剂或激动剂的筛选及配体亲和力的评价，为后续的雄激素受体靶向的药物设计提供了基础。

技术领域

本发明涉及一种雄激素受体小分子荧光探针及其制备方法和应用，属于雄激素受体小分子荧光探针技术领域。

背景技术

前列腺癌(PCa)是一种高发于老年男性泌尿生殖系统的恶性肿瘤，具有很高的发病率和致死率。我国前列腺癌的发病率呈逐年上升的趋势，其发病率和病死率目前已居男性泌尿生殖系肿瘤首位，且大部分患者在初次确诊时即已处于晚期。其中，在前列腺癌的发生和发展过程雄激素和雄激素受体(AR)具有关键性作用。雄激素受体(androgenreceptor,AR)属于核受体超家族中的类固醇受体，是一种配体依赖型的反式转录调节蛋白。人类的AR基因全长约90kb，分子质量约110kD，共编码919个氨基酸。AR包含N端域(N-terminal domain,NTD)、DNA结合域C(DNA-binding domain,DBD)、铰链区以及配体结合域(ligand-binding domain,LBD)4个结构(Liu C.et al.Prostate,2015,75:1341-1353)。由于PC的进展主要受雄激素的刺激，因此抑制雄激素的分泌、作用对控制PC的发展非常有效。近几年来，科学家们一直致力于开发一种可以治疗癌症的AR小分子拮抗剂，且已有多个药物成功上市，如恩杂鲁胺等药物。但是目前已上市的药物仍存在缺陷：如:(1)20％至40％的患者对现有的AR拮抗剂无反应；(2)AR拮抗剂需要很高的饱和药物浓度才能实现其临床益处，这也是目前药物开发过程中所面临的一个重大挑战；(3)长期用药会不可避免地产生抗药性；(4)大约75％的临床样本中存在缺少AR-LBD区域的AR剪接变体7(ARV7)；(5)AR过度表达和其他AR信号传导机制。为了解决现有AR拮抗剂的耐药问题，仍然需要开发新的AR拮抗剂。因此体外抑制活性测试方法以及高通量筛选方法对AR小分子抑制剂的发展至关重要。准确、稳定、可靠的活性测试方法有助于发现结构新颖的先导化合物，指导先导化合物的结构优化以及获得活性更优的候选药物分子，为靶向GLS1的肿瘤疾病的治疗药物的开发奠定基础。

如今，运用小分子荧光探针作为辅助工具，多种小分子与生物大分子的作用模式被确定，这些信息对合理药物设计具有十分重要的意义。比如新的药物靶点的发现，或者对一个已知蛋白的功能做新的阐述，这对于分子水平阐明疾病的发生、发展和治疗尤其重要。以小分子荧光探针作为辅助工具，这些靶点可被发展为高效的高通量筛选模型，并在短时间内随机筛选大量的活性化合物，发现活性更高的小分子化合物作为先导物用于进一步的药物研发。

发明内容

发明目的：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种雄激素受体小分子荧光探针及其制备方法和应用。

技术方案：为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种雄激素受体小分子荧光探针，其结构式如下式(I)所示：

所述雄激素受体小分子荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

S1:原料T1与T2进行环合反应，合成硫代乙内酰脲环得中间体T3；

S2:将中间体T3与与异硫氰酸荧光素FITC进行缩合反应，即得所述雄激素受体小分子荧光探针。

优选的，步骤S1中，所述T1和T2的摩尔比为1:1～1:2。

优选的，步骤S1中，所述环合反应选用的有机溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃(THF)、乙腈或二甲亚砜(DMSO)中的一种或几种。