[发明专利]人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂、重组乙肝疫苗、表达方法有效

专利信息
申请号: 202110893768.6 申请日: 2021-08-05
公开(公告)号: CN113621577B 公开(公告)日: 2023-03-10
发明(设计)人: 王天云;林艳;窦媛媛;张俊河;樊振林;曹祥祥;耿少雷;李波 申请(专利权)人: 河南普诺易生物制品研究院有限公司;新乡医学院
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N5/073;C12N5/071;C07K14/02;C12N15/85;A61K39/29;A61P31/20;A61P1/16
代理公司: 新乡市挺立众创知识产权代理事务所(普通合伙) 41192 代理人: 林海
地址: 453000 河南省新乡市新飞大道178*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 人源化 hek293 细胞系 表达 重组 蛋白 培养基 添加剂 乙肝疫苗 方法
【权利要求书】:

1.人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂,其特征在于,包括丁酸钠和氢化肉桂酸;重组蛋白表达载体转染HEK293细胞,悬浮培养过程中添加所述培养基添加剂;其中丁酸钠添加量为2.0 ~ 2.5 mol/L,氢化肉桂酸的添加量为0.6~ 0.8 mol/L。

2.如权利要求1所述的人源化HEK293细胞系表达重组蛋白用培养基添加剂,其特征在于,重组蛋白载体转染HEK293细胞,悬浮培养24小时后添加所述培养基添加剂。

3. 如权利1~2任一项所述的培养基添加剂在重组乙肝疫苗表达方面的应用,其特征在于,包括将包含乙肝表面抗原序列的表达载体转染HEK293细胞,悬浮培养过程中添加培养基添加剂;所述培养基添加剂包括丁酸钠和氢化肉桂酸;丁酸钠添加量为2.0 ~ 2.5 mol/L,氢化肉桂酸的添加量为0.6~ 0.8 mol/L。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,将包含乙肝表面抗原序列的表达载体转染HEK293细胞,悬浮培养24h后添加所述培养基添加剂。

5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,将包含乙肝表面抗原序列的表达载体在溶解有转染试剂的DMEM高糖培养基中转染HEK293细胞培养48小时后,转移进行悬浮培养,悬浮培养24h后添加所述培养基添加剂。

6.如权利要求3所述的应用,其特征在于,将包含乙肝表面抗原序列的表达载体转染HEK293细胞,37℃悬浮培养24小时后,降温至33℃低温培养。

7.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述包含乙肝表面抗原序列的表达载体的启动子为CAG启动子。

8. 如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述乙肝表面抗原序列如SEQ ID NO:1所示。

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