[发明专利]猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白、含该Nsp9蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 202110892948.2 | 申请日: | 2021-08-04 |
| 公开(公告)号: | CN113583141B | 公开(公告)日: | 2023-03-03 |
| 发明(设计)人: | 辛秀;孔令保;余琦佳;杨黎 | 申请(专利权)人: | 江西农业大学 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/215;A61K39/39;A61P31/14;G01N33/569;G01N33/68 |
| 代理公司: | 济南光启专利代理事务所(普通合伙) 37292 | 代理人: | 邹文婷 |
| 地址: | 330045 江西省南*** | 国省代码: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 流行性 腹泻 病毒 nsp9 蛋白 融合 及其 制备 方法 应用 | ||
1.猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白和融合蛋白在制备猪流行性腹泻病毒疫苗中的应用;所述融合蛋白由MBP蛋白和猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白组成,所述猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示,MBP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白和融合蛋白在制备猪流行性腹泻病毒诊断试剂中的应用;所述融合蛋白由MBP蛋白和猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白组成,所述猪流行性腹泻病毒Nsp9蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示,MBP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述融合蛋白的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:提取猪流行性腹泻病毒RNA,反转录为Nsp9 cDNA;
步骤2:设计与合成猪流行性腹泻病毒的Nsp9基因的引物,扩增猪流行性腹泻病毒的Nsp9基因;
步骤3:将猪流行性腹泻病毒的Nsp9基因与含有MBP基因的载体连接,鉴定后转化感受态细胞;
步骤4:重组蛋白MBP-Nsp9的表达,纯化,鉴定。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述MBP-Nsp9蛋白最佳表达温度为32℃。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述MBP-Nsp9蛋白最佳表达时间为8h。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述MBP-Nsp9蛋白最佳IPTG浓度为1mM。
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