[发明专利]一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组、试剂盒和应用

说明书

本发明提供了一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组、试剂盒和应用，涉及生物检测技术领域。本发明所述引物探针组包括HRH1‑F、HRH1‑R和探针H1‑Probe；所述HRH1‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HRH1‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针H1‑Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明提供了包含所述引物探针组的试剂盒和检测方法，可利用RNA一步法检测HRH1 mRNA表达水平，为HRH1蛋白的检出提供准确度高、检测范围广、灵敏度高的检测手段。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组、试剂盒和应用。

背景技术

组织胺(Histamine)是一种活性胺化合物，是广泛存在于动植物体内的一种生物胺，是由组氨酸脱羧而形成的，通常贮存于组织的肥大细胞中。是身体内的一种重要的化学传导物质，可以影响许多细胞的反应，包括过敏、炎性反应、胃酸分泌等，当机体受到某种刺激引发抗原-抗体反应时，引起肥大细胞的细胞膜通透性改变，释放出组胺，与组胺受体作用产生病理生理效应。组胺合成过程主要发生在肥大细胞、嗜碱性粒细胞、肺部、皮肤和胃肠粘膜中，和储存组胺的组织相一致。组胺与其他递质一样，先和靶细胞上特异性受体结合，从而改变细胞的生物活性，并发挥广泛的生理或病理作用。组胺的炎症作用，即组胺对体内的免疫动态平衡的影响依赖于现行已知的4个组胺受体的表达和活性。这4个组胺受体按被发现顺序命名为：组胺1型受体(H1)、组胺2型受体(H2)、组胺3型受体(H3)、组胺4型受体(H4)，其中，H1受体在介导过敏性炎症的发生中起着非常重要的作用，包括促进树突细胞成熟，调节Th1/Th2细胞之间平衡。H1受体属于G蛋白偶联受体(Gprotein-coupledreceptors，GPCR)的类视紫红质家族成员，主要在内皮、平滑肌、血管内皮细胞，心脏和中枢神经系统中表达，调节血管舒张和支气管收缩，是变态反应主要的治疗靶位。当组胺作用于H1受体后，细胞内环磷酸鸟苷(C-GMP)增多，表现心率加快，血管收缩，支气管、小肠平滑肌收缩和微血管通透性增高。一般情况下，H1受体的活化形式与非活化形式处于一种平衡状态。在过敏性疾病中，大量的IgE刺激肥大细胞和嗜碱性粒细胞释放组胺，使组胺受体活化导致过敏性疾病的症状。组胺受体mRNA在过敏患者体内的表达水平高于健康人的表达水平。

H1抗组胺药物广泛用于季节性和常年过敏性鼻炎、荨麻疹及特应性皮炎等过敏性疾病的治疗，主要通过反向激动H1受体的非活化形式发挥其抗组胺作用。H1抗组胺药物不仅能够下调组胺诱导的H1受体mRNA的表达水平，在没有组胺刺激的情况下，也可以下调H1受体基础表达水平，降低其固有活性。

大部分过敏性疾病患者的治疗方式都是医生凭经验采用对症治疗，用抗组胺药来减轻过敏症状，但抗组胺治疗并非对所有患者有效，也无法量化治疗效果，但是目前没有相关的研究和记载。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组、试剂盒和应用，可一步法定量检测HRH1 mRNA的表达水平，为该蛋白的检出提供准确度高、检测范围广及灵敏度高的检测手段。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组，所述引物探针组包括HRH1-F、HRH1-R和探针H1-Probe；

所述HRH1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HRH1-R的核苷酸序列如SEQID NO.2所示，所述探针H1-Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

优选的，所述引物探针组还包括内参基因GAPDH的引物对和探针，所述GAPDH的引物对包括GAPDH-F和GAPDH-R，所述探针包括G-Probe；