[发明专利]一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组、试剂盒和应用

权利要求书

1.一种人组胺受体HRH1 mRNA检测引物探针组，其特征在于，所述引物探针组包括HRH1-F、HRH1-R和探针H1-Probe；

所述HRH1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HRH1-R的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示，所述探针H1-Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述引物探针组，其特征在于，所述引物探针组还包括内参基因GAPDH的引物对和探针，所述GAPDH的引物对包括GAPDH-F和GAPDH-R，所述探针包括G-Probe；

所述GAPDH-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述GAPDH-R的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示，所述G-Probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

3.根据权利要求1或2所述引物探针组，其特征在于，在所述探针H1-Probe和G-Probe的5’端各标记不同的荧光标记基团，3’端标记相同或不同的淬灭基团。

4.根据权利要求3所述引物探针组，其特征在于，所述荧光标记基团包括FAM或JOE，所述淬灭基团包括BHQ1。

5.一种一步法检测人组胺受体HRH1 mRNA表达水平的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1～4任一项所述引物探针组的混合液、PCR反应液、酶混合液、人组胺受体HRH1标准品、ROX参比染料和无核酶水。

6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述混合液中HRH1-F、HRH1-R、探针H1-Probe、GAPDH-F、GAPDH-R和G-Probe的浓度分别为1nM、1nM、1.5nM、2nM、2nM和3nM。

7.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括dNTP mix、MgCl₂和缓冲液；

所述酶混合液包括Taq酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂和Taq酶抗体；所述Taq酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂和Taq酶抗体的质量比为15:6:3:1。

8.权利要求1～4任一项所述引物探针组或权利要求5～7任一项所述试剂盒在制备免疫性疾病治疗用药依据或动态监测治疗效果的工具中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，利用所述引物探针组或所述试剂盒配制反应体系，并进行qRT-PCR反应；

所述反应体系以20μL计，包括：无核酶水2.4μL，PCR反应液10μL，酶混合液0.5μL，ROX参比染料0.5μL，引物探针组的混合液2μL和标准品或RNA5μL。

10.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述qRT-PCR反应的程序包括：42℃30min；95℃1min；95℃5s，60℃31s，40个循环。