[发明专利]一种同时检测动物源性食品中四十八种兴奋剂的方法

说明书

本发明一种同时检测动物源性食品中四十八种兴奋剂的方法，先根据不同类别试样进行提取和除水，再将得到的上清液在合适的温度吹干，通过试剂溶解得到的残渣，经涡旋振荡和过滤，形成各自的待测液，利用高效液相色谱串联质谱仪测定待测液和混合标准工作液中的兴奋剂，通过得到的谱图信息进行比对，判断试样中存在相应的目标物；根据兴奋剂和对应内标物的峰面积，结合各个待测液获得过程中的提取体积、试样量、稀释倍数，采用外标法定量，求出齐帕特罗、非诺特罗、去甲乌药碱和苯丙酸诺龙的含量，采用内标法定量可求出除齐帕特罗、非诺特罗、去甲乌药碱和苯丙酸诺龙以外所有兴奋剂的含量。

技术领域

本发明涉及食品中兴奋剂检测技术领域，具体为一种同时检测动物源性食品中四十八种兴奋剂的方法。

背景技术

为维护竞技体育的公平和纯洁，保护运动员的身心健康，兴奋剂检测已成为所有体育比赛中不可或缺的重要环节。兴奋剂种类繁多，结构差异大，并且随着时间的推移不断有新的兴奋剂涌现。

为满足兴奋剂检测的要求，兴奋剂检测需要不断完善检测程序，提高检测方法的灵敏度和准确性。兴奋剂的检测技术也在不断发展。以前曾采用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用(GC/MSD)等方法进行检测。为有效解决某些药物检测过程中需要衍生化、操作复杂、检测周期长、灵敏度较差等问题，目前已经采用更为先进的、灵敏度更高的气相色谱-质谱和液相色谱-质谱联用检测方法，但无法对猪肉、牛肉、鸡肉、蛋、奶或水产等动物源性食品中常见的48种兴奋剂同时进行测定。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种同时检测动物源性食品中四十八种兴奋剂的方法，采用先对不同类别的食品分别进行提取、除水，之后采用高效液相色谱串联质谱法，可对猪肉、牛肉、鸡肉、蛋、奶、水产等食品动物源性食品中48种兴奋剂同时进行测定。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种同时检测动物源性食品中四十八种兴奋剂的方法，所述同时检测的四十八种兴奋剂为克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特布他林、沙美特罗、非诺特罗、妥布特罗、喷布特罗、西马特罗、肾上腺素、普萘洛尔、阿替洛尔、美托洛尔、克仑丙罗、曲托喹酚、去甲乌药碱、美雄酮、司坦唑醇、甲基睾酮、丙酸睾酮、诺龙、丙酸诺龙、苯丙酸诺龙、勃地酮、群勃龙、睾酮、β-玉米赤霉醇、泽仑诺、齐帕特罗、泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、氟氢可的松、甲基泼尼松龙、倍氯米松、可的松、氢化可的松、乙酰唑胺、坎利酮、氯噻酮、呋塞米、螺内酯、卞氟噻嗪、氯噻嗪、氢氯噻嗪、氨苯蝶啶和4-氨基-6-氯苯-1，3二磺酰胺，包括如下步骤：

步骤1，按如下方式获得不同动物源性食品相应的待测液：

步骤1a，在畜禽肉、畜禽肉制品、蛋或蛋制品形成的试样中加入与所述四十八种兴奋剂对应的同位素内标标准物质形成的混合同位素内标中间液，之后用甲酸的乙腈溶液进行提取，然后用无水硫酸钠除水，无水硫酸钠和所述试样的质量比为(2～5)g：(4.88～5.12)g，离心得到上清液，然后剩余固体部分用相同的方式进行提取，合并两次上清液，得到上清液a，将上清液a在30～50℃下吹干，得到残渣a，将残渣a用乙腈的水溶液溶解，最后涡旋振荡、过滤，得到待测液a；

步骤1b，当所述的动物源性食品为水产品或水产品制品时，将水产品或水产品制品按照步骤1a对应的方式处理，得到上清液b，将上清液b的脂肪和水分去除后，将所得上清液在30～50℃下吹干，得到残渣b，将残渣b用含甲酸的乙腈水溶液溶解，最后依次涡旋振荡、除动物脂肪、过滤，得到待测液b；

步骤1c，当所述的动物源性食品为乳时，将乳按照步骤1a的方式处理，并且将甲酸的乙腈溶液替换为乙腈，得到待测液c；