[发明专利]一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂及其制备方法

说明书

本申请涉及重组蛋白领域，一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂及其制备方法。一种人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂，由包括人绒毛膜促性腺激素、至少一种赋形剂和至少一种PH调节剂经冻干工艺制备得到。本发明人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂，采用蔗糖作为冻干赋形剂，在适当的PH条件下进行冻干，得到的冻干产品外观饱满，支撑结构良好。

技术领域

本申请涉及重组蛋白领域，尤其涉及一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

hCG的研究和应用最早可追溯至二十世纪三十年代。一直以来以孕妇尿液为原料，通过沉淀、离子交换层析等方法制备。含较多杂质、来源不确定、有传染疾病风险以及批间差异、易发生过敏反应等，在临床使用中存在风险，之后研究者把研发重点放在了利用重组技术制备和生产，并在临床上逐渐取代尿源HCG。

虽然rhCG与u-HCG具有基本相同的分子结构和药理药代特点，但rhCG在纯度、效价和安全性等方面较u-HCG具有较大的优势。rhCG存在于CHO细胞的培养液中，培养液中存在多种杂质，须通过有效的分离纯化方法去除，才能获得纯度、比活和安全性达到药典要求的重组蛋白。目前常用的纯化方法也是多种层析和膜过滤方法的组合。应用研究系统股份公司(ARS)采用C4硅胶、DEAE琼脂糖凝胶、CM琼脂糖凝胶和C18反相层析，再利用超滤浓缩并去除小分子杂质，最后利用凝胶过滤层析去除及游离的α和β亚基，并获得了相关专利(EP2001/000665、ZL 01805363.7)。

根据文献报道信息：上市药品重组绒促性素的粉针制剂处方组成为每支含有285微克重组绒促性素、30mg蔗糖、0.98mg磷酸和氢氧化钠(用于pH调节)。复溶的pH值为6.5至7.5。另外，上市重组绒促性素粉针制剂中用到的辅料是磷酸和氢氧化钠作为缓冲体系维持PH值范围。在注射剂中所用的辅料越少，溶液中的离子根的种类越少，制剂潜在的未知风险就越小。

发明内容

本发明的目的是在于提供一种稳定性好、有关物质少的重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂。

本发明的另一目的在于提供一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法。

为了实现上述发明目的，本发明采用了如下技术方案：一种人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂，由包括人绒毛膜促性腺激素、至少一种赋形剂和至少一种PH调节剂经冻干工艺制备得到。

进一步的，所述的赋形剂是蔗糖。进一步的，所述的PH调节剂是由一水磷酸二氢钠和磷酸氢二钠。进一步的，所述的一水磷酸二氢钠、磷酸氢二钠的重量百分比为1：1.6。进一步的，所述PH调节剂将复溶后的PH控制在6.5至7.5。进一步的，所述的人绒毛膜促性腺激素是使用CHO细胞中发酵表达的重组蛋白rhCG并经纯化获得。进一步的，所述的使用CHO细胞中发酵表达的发酵混合培养基中加入氯化锰，在补料培养基中加入氢化可的松和焦磷酸钠。

一种人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备工艺，包括溶液配制、除菌过滤、灌装、冷冻干燥，除菌过滤采用0.22微米的聚醚砜材质的2.5英寸滤芯。进一步的，所述的人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备工艺，其特征在于溶液配制时，1000ml溶液中包括人绒毛膜促性腺激素500毫克、一水磷酸二氢钠1.076mg、磷酸氢二钠1.732mg，加注射用水至1000ml。进一步的，一种人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备工艺，冷冻干燥的工艺参数为：预冻：板层温度-40～-50℃；全速降温；维持时间2-4小时；第一次升华：真空度小于20Pa，1小时内升温至-25～-32℃℃，保持30-40小时，真空度控制在10Pa±2Pa；第二次升华：1小时内升温至0℃，恒温保温5-10小时，真空度控制在20Pa±2Pa，1小时内升温至32℃，真空度控制在20Pa±2Pa，恒温保持5-10小时。