[发明专利]一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂及其制备方法

权利要求书

1.一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，由包括人绒毛膜促性腺激素、至少一种赋形剂和至少一种PH调节剂经冻干工艺制备得到，其特征在于所述的人绒毛膜促性腺激素是使用CHO细胞中发酵表达的重组蛋白rhCG并经纯化获得，使用CHO细胞表达重组rhCG的补料培养发酵时，是将密度1.5*10⁶cells/ml以上的细胞接种到发酵混合培养基里，接种完的当天，定为第一天，在培养第3、6、9天时分别加入补料培养基；补料培养基中包括浓度为0.05 mg/ml的氢化可的松和3mg/ml的焦磷酸钠；所述的冻干工艺包括溶液配制、除菌过滤、灌装、冷冻干燥，除菌过滤采用0.22微米的聚醚砜材质的2.5英寸滤芯；溶液配制时，1000ml溶液中包括人绒毛膜促性腺激素500毫克、一水磷酸二氢钠 1.076 mg、磷酸氢二钠1.732mg，加注射用水至1000ml。

2.根据权利要求1所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于使用CHO细胞表达重组rhCG的补料培养发酵的发酵时间为12日。

3.根据权利要求2所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于发酵过程中的参数为：36.5±1℃、pH控制在6.8-7.2、溶氧控制在20-70%，转速控制在60±5转/分。

4.根据权利要求1所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于所述的PH调节剂是一水磷酸二氢钠和磷酸氢二钠。

5.根据权利要求4所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于所述的一水磷酸二氢钠、磷酸氢二钠的重量百分比为1：1.6。

6.根据权利要求4所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于所述PH调节剂将复溶后的pH 控制在6.5至7.5。

7.根据权利要求6所述的一种重组人绒毛膜促性腺激素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于冷冻干燥的工艺参数为：预冻：板层温度-40～-50℃；全速降温；维持时间2-4小时；第一次升华：真空度小于20Pa，1小时内升温至-25～-32℃℃，保持30-40小时，真空度控制在10Pa±2Pa；第二次升华：1小时内升温至0℃，恒温保温5-10小时，真空度控制在20Pa±2Pa，1小时内升温至32℃，真空度控制在20Pa±2Pa，恒温保持5-10小时。