[发明专利]一种协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法及其制剂

权利要求书

1.一种协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）过氧化氢酶-光敏剂胶束CAT-Ce6-m的制备：将光敏剂Ce6溶解于溶剂中，加入1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺进行反应，继续加入过氧化氢酶进行酯化反应，反应后进行透析得到CAT-Ce6-m；

（2）载过氧化氢酶-光敏剂胶束的ROS响应型脂质体CAT-Ce6-m@lip的制备：称取磷脂，胆固醇在有机溶剂中超声溶解，减压成膜，除去有机溶剂，加入过氧化氢酶-光敏剂胶束水合，得到CAT-Ce6-m@lip；步骤（2）所述磷脂为具有ROS响应的不饱和磷脂；

（3）干细胞外泌体exo的提取及分离纯化：培养间充质干细胞，超速离心法提取外泌体；

（4）将步骤（2）中的脂质体与步骤（3）中的外泌体混合，利用挤出器挤出，得脂质体-外泌体膜融合载体CAT-Ce6-m@lip-exo；

（5）将步骤（4）的膜融合载体与凝胶混合，搅拌均匀，即得协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂CAT-Ce6-m@lip-exo-gel。

2.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述有机溶剂为低链醇。

3.根据权利要求1或2所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述磷脂为大豆卵磷脂，所述有机溶剂为无水乙醇。

4.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述磷脂与胆固醇的质量比8:1-3:1。

5.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述减压成膜和水合的温度为25-30℃。

6.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述脂质体与外泌体的质量比为5:1-1:5。

7.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述挤出过程为：分别通过孔径直径为5 μm、1 μm、500 nm、200 nm的聚碳酸酯膜挤出，每种孔径反复挤出10-15次。

8.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（5）所述凝胶采用的凝胶基质为卡波姆934、卡波姆940、卡波姆941中的一种或几种，所述凝胶基质浓度为1%-5%。

9.根据权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法，其特征在于，步骤（5）所述膜融合载体与凝胶的质量比为3:1-1:3。

10.一种权利要求1所述的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂的制备方法所制备的协同促进创面愈合的外泌体仿生制剂。