[发明专利]一种吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，采用纳米仿生技术，以肺表面活性剂功能性成分为材料，模拟肺表面活性剂在肺泡表面的多膜结构，利用薄膜分散法制备肺表面活性剂纳米仿生体，同时在其脂质层负载活性氧清除剂虾青素，内核中包载抗肺纤维化药物吡非尼酮，构建具有修复、治疗一体化的纳米药物递送系统的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体，具体包括以下步骤：

（1）将5～30mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、2～10mg胆固醇、3～20mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5～30mL氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取5～10mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2～3mg/mL虾青素溶液；

（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入瓶中，在43℃、压强0.05-0.06Kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2mL浓度为2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；

（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100W，使其形成单层囊泡；

（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入400～500µL浓度为2mg/mL的Ca²⁺溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。

2.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将17.5mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、6mg胆固醇、11.5mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于27.5mL氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取7.5mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2.5mg/mL虾青素溶液；

（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入瓶中，在43℃、压强0.055Kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2mL浓度为2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；

（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100W，使其形成单层囊泡；

（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入450µL浓度为2mg/mL的Ca²⁺溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。

3.根据权利要求1所述的吸入式肺表面活性剂纳米仿生体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将20.3mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、5.8mg胆固醇、12.4mg卵磷脂三种脂质材料分别溶于5mL氯仿中，然后将配制的溶液涡旋震荡混匀，保存放于4℃备用；称取5.2mg虾青素溶于氯仿，配制成浓度为2.6mg/mL虾青素溶液；

（2）按照质量比二棕榈酰磷脂酰胆碱：胆固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步骤（1）中配制好的相应脂质材料溶液以及虾青素溶液置入茄形瓶中，旋转蒸发仪水浴锅在43℃、压强0.05-0.06Kpa的条件下进行旋蒸，除去溶剂，茄形瓶内壁得到一层均匀的白色薄膜，加入2mL浓度为2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，将得到的溶液转移至离心管；

（3）将步骤（2）中离心管内的溶液利用超声波细胞粉碎机进行冰浴探超处理，探超条件为：工作5s，间歇6s，总工作时间2min，功率100W，使其形成单层囊泡；

（4）将步骤（3）得到的单层囊泡溶液中加入400µL浓度为2mg/mL的Ca²⁺溶液，进行涡旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，两者交替进行1h，得肺表面活性剂纳米仿生体。