[发明专利]一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法

说明书

本发明提供了一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法，包括生物酶提取、卵清蛋白溶液提取、酶解反应和卵白蛋白提取四个步骤，所述生物酶提取是从木瓜中经榨汁、PH调节、搅拌过滤和分离提纯四个过程获取木瓜蛋白酶，所述卵清蛋白溶液提取是从蛋液中经卵清分离、蛋白质溶液获取、PH调节和脱洗四个过程分离得到卵清蛋白溶液，所述酶解反应是将所述木瓜蛋白酶和所述卵清蛋白溶液混合并进行酶解得到含有卵白蛋白的酶解液，所述卵白蛋白提取是从酶解液中经灭酶、萃取、灭菌、浓缩和冷冻干燥五个过程提纯卵白蛋白。通过上述过程能够得到高提取率的卵白蛋白，提高生产效率。

技术领域

本发明涉及生物蛋白领域，尤其涉及一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法。

背景技术

利用现代高科技把卵清进行生化酶解，得到具有很强生物活性的小分子多肽就是酶解卵白蛋白。多肽因组成结构的不同而对人体具有不同的功能，概括起来为抑制、激活、修复和促进。抑制细胞病变，增强人体免疫力；激活细胞活性，清除对人体有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合成与调控。

现在已经开发出了很多酶解蛋白的方法，经过我们大量的检索与参考，发现现有的方法有如公开号为KR101182023B1，KR101393267B1和KR101522042B1所公开的方法，个方法将待水解的蛋白质进行清洗、除杂，再将蛋白质进行酶水解。酶水解时以外源酶中性蛋白酶或碱性蛋白酶或中性蛋白酶与碱性蛋白酶而成的混合复合蛋白酶为水解酶，以缓冲溶液控制酶水解反应体系中的pH值，以蚯蚓或粮食为待水解的蛋白质，将计量好的蛋白质、水解酶、缓冲溶液加入反应容器，反应温度为20℃～75℃之间，反应时间至少为2小时，即得含有氨基酸、小分子肽、核苷酸、甘油、脂肪酸等为主要成分的多种物质组成的高活性酶解液；但使用该工艺获得的酶解卵白蛋白提取率不够高，导致生产效率有待提升。

发明内容

本发明的目的在于，针对在所存在的不足，提出了一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法，

为了克服现有技术的不足，本发明采用如下技术方案：

一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法，包括生物酶提取、卵清蛋白溶液提取、酶解反应和卵白蛋白提取四个步骤，所述生物酶提取是从木瓜中获取木瓜蛋白酶，所述卵清蛋白溶液提取是从蛋液中分离得到卵清蛋白溶液，所述酶解反应是将所述木瓜蛋白酶和所述卵清蛋白溶液混合并进行酶解得到含有卵白蛋白的酶解液，所述卵白蛋白提取是从酶解液中提纯卵白蛋白；

进一步的，所述生物酶提取包括榨汁、PH调节、搅拌过滤和分离提纯四个过程，所述搅拌过滤过程重复两次，第一次搅拌过程中加入20％的硫酸铵溶液，第二次搅拌过程加入40％的硫酸铵溶液；

进一步的，所述分离提纯过程采用羟基磷灰石柱色谱法提纯木瓜蛋白酶；

进一步的，所述搅拌过滤过程在300W功率的超声波以及40℃的温度环境下进行；

进一步的，所述卵清蛋白溶液提取包括卵清分离、蛋白质溶液获取、PH调节和脱洗四个过程，所述卵清分离过程通过在蛋液中加入盐粒降低蛋清的粘稠度，再使用卵清分离装置分离出卵清；

进一步的，将所述卵清加水搅拌均匀后，倒入电泳槽的阴极，在100V的电压下进行电泳10分钟，在电泳槽的阳极处收集蛋白质溶液，所述电泳槽的阴极为钕铁硼磁体，所述电泳槽的阳极为锌铝层状双氢氧化物，将所述蛋白质溶液和酶解缓冲液以1:6的比例混合，并用100W的超声波处理5分钟，所述酶解缓冲液由钨酸钠、三氟乙醇和钼酸钠按质量比为6g:20g-35g:10g-20g混合在一起并加入300ml的水搅拌均匀而得；

进一步的，所述酶解反应在15℃的酶解反应装置中进行，并用超声波进行脉冲式处理；

进一步的，所述卵白蛋白提取包括灭酶、萃取、灭菌、浓缩和冷冻干燥五个过程，所述萃取过程中使用的萃取液由2.5％的三氟乙酸、60％的乙腈混合而成。