[发明专利]一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法在审
申请号: | 202110842338.1 | 申请日: | 2021-07-26 |
公开(公告)号: | CN113583108A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 吴艳;张悦勤 | 申请(专利权)人: | 吴艳 |
主分类号: | C07K14/77 | 分类号: | C07K14/77;C07K1/34;C07K1/14;C12P21/06 |
代理公司: | 北京清控智云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11919 | 代理人: | 马肃 |
地址: | 110036 辽宁省沈阳市*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酶解卵清 获得 卵白 蛋白 方法 | ||
1.一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,包括生物酶提取、卵清蛋白溶液提取、酶解反应和卵白蛋白提取四个步骤,所述生物酶提取是从木瓜中获取木瓜蛋白酶,所述卵清蛋白溶液提取是从蛋液中分离得到卵清蛋白溶液,所述酶解反应是将所述木瓜蛋白酶和所述卵清蛋白溶液混合并进行酶解得到含有卵白蛋白的酶解液,所述卵白蛋白提取是从酶解液中提纯卵白蛋白。
2.如权利要求1所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述生物酶提取包括榨汁、PH调节、搅拌过滤和分离提纯四个过程,所述搅拌过滤过程重复两次,第一次搅拌过程中加入20%的硫酸铵溶液,第二次搅拌过程加入40%的硫酸铵溶液。
3.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述分离提纯过程采用羟基磷灰石柱色谱法提纯木瓜蛋白酶。
4.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述搅拌过滤过程在300W功率的超声波以及40℃的温度环境下进行。
5.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述卵清蛋白溶液提取包括卵清分离、蛋白质溶液获取、PH调节和脱洗四个过程,所述卵清分离过程通过在蛋液中加入盐粒降低蛋清的粘稠度,再使用卵清分离装置分离出卵清。
6.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,将所述卵清加水搅拌均匀后,倒入电泳槽的阴极,在100V的电压下进行电泳10分钟,在电泳槽的阳极处收集蛋白质溶液,所述电泳槽的阴极为钕铁硼磁体,所述电泳槽的阳极为锌铝层状双氢氧化物,将所述蛋白质溶液和酶解缓冲液以1:6的比例混合,并用100W的超声波处理5分钟,所述酶解缓冲液由钨酸钠、三氟乙醇和钼酸钠按质量比为6g:20g-35g:10g-20g混合在一起并加入300ml的水搅拌均匀而得。
7.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述酶解反应在15℃的酶解反应装置中进行,并用超声波进行脉冲式处理。
8.如上述权利要求之一所述的一种酶解卵清获得酶解卵白蛋白的方法,所述卵白蛋白提取包括灭酶、萃取、灭菌、浓缩和冷冻干燥五个过程,所述萃取过程中使用的萃取液由2.5%的三氟乙酸、60%的乙腈混合而成。
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