[发明专利]具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法

权利要求书

1.一种具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)基于生物信息学预测不同蛋白酶处理山羊奶酪蛋白得到山羊奶酪蛋白肽的降血糖、降血压活性，并利用生物信息学计算机虚拟筛选出较高降血糖、降血压活性的多种酶；

(2)将计算机模拟筛选出的多种酶中的任一种或者组合分别应用于酶解山羊奶酪蛋白，得到对应的酶解产物；

(3)试验测试并比较不同酶解产物的降血糖、降血压活性，验证计算机虚拟筛选的准确性，并得到更高降血糖、降血压活性的酶的种类，由更高降血糖、降血压活性的酶酶解处理得到的酶解产物即为具有更高降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽。

2.根据权利要求1所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：

从蛋白质三维结构数据库RCSB PDB(https://www1.rcsb.org/)中下载山羊乳酪蛋白的各种蛋白类型的一级结构；利用BIOPEP数据库(http://www.uwm.edu.pl/biochemia/biopep/start_biopep.php)中的“ENZYME(S)ACTION”功能对不同类型的山羊乳酪蛋白进行的虚拟蛋白酶切割，并根据蛋白酶切割后的具有DPP-IV酶、ACE酶的抑制活性的肽片段数量a和氨基酸链长度N的比率预测蛋白酶切割后的肽序列的降血糖、降血压活性，筛选出较高降血糖、降血压活性的多种酶。

3.根据权利要求2所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)筛选出的较高降血糖、降血压活性的多种酶为菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K、木瓜蛋白酶+蛋白酶K组合酶。

4.根据权利要求1所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的山羊奶酪蛋白由山羊奶预处理得到。

5.根据权利要求4所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，山羊奶预处理具体包括：将山羊奶脱脂、凝乳酶沉淀酪蛋白、收集沉淀物步骤，其中收集的沉淀物即为山羊奶酪蛋白。

6.根据权利要求1所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中酶解山羊乳酪蛋白的具体操作为：将山羊奶酪蛋白加入蒸馏水，配制成质量浓度为2-10％的反应底物，之后加入所述步骤(1)筛选出的多种酶中的任一种或者组合，使蛋白酶与底物的最终比例E/S为3000-15000U/g，按照不同酶种类的最佳酶解条件进行反应，酶解过程中保持恒定的pH值，反应结束后灭酶，离心收集沉淀冻干，粉碎即为酶解产物山羊乳酪蛋白肽。

7.根据权利要求1所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，在所述步骤(3)之后还包括山羊乳酪蛋白肽的纯化步骤：将冷冻干燥后的山羊乳酪蛋白肽用蒸馏水溶解，然后用超滤膜进行分离纯化，取滤液冷冻干燥即为纯化后的山羊乳酪蛋白肽。

8.根据权利要求1所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)得到的更高降血糖、降血压活性的酶为木瓜蛋白酶+蛋白酶K组合酶，其中，木瓜蛋白酶：蛋白酶K的复合质量比为1～2:1～2，得到的山羊乳酪蛋白肽DPP-IV抑制率不低于86％，山羊乳酪蛋白肽ACE抑制率不低于82％，蛋白回收率不低于85％。

9.根据权利要求8所述的具有降血糖、降血压活性的山羊奶酪蛋白肽的制备方法，其特征在于，木瓜蛋白酶：蛋白酶K的复合质量比为1.5：1.0，得到的山羊乳酪蛋白肽DPP-IV抑制率为91％；

或，木瓜蛋白酶：蛋白酶K的复合质量比为1.0：2.0，得到的山羊乳酪蛋白肽ACE抑制率为86％。

10.权利要求1-9中任一项所述方法制备的山羊乳酪蛋白肽在辅助治疗高血压和/或糖尿病的保健食品和药品的制备中的应用。