[发明专利]一种基于铜纳米颗粒的检测赭曲霉毒素A的生物传感器

说明书

本发明属于传感器技术领域，涉及一种基于铜纳米颗粒的检测赭曲霉毒素A的生物传感器。基于OTA及其适配体的特异性识别、SDA反应、HCR反应以及DNA四面体的特殊性质构建了电化学生物传感器。该传感器具有检测速度快，检测限低，特异性高等优点，可以弥补OTA现有检测方法的缺陷与不足，实现对其快速、准确的定量检测。

技术领域

本发明属于传感器技术领域，涉及一种基于铜纳米颗粒的检测赭曲霉毒素A的生物传感器。

背景技术

赭曲霉毒素 A(ochratoxin A， OTA)是曲霉属和青霉属等有毒真菌产生的一类次级代谢产物， 是常见污染食品的五大真菌毒素之一， 具有较强的肾毒性、肝毒性、神经毒性和免疫毒性， 以及致畸、致癌和致突变作用。OTA 广泛存在于各种谷物及其制品、葡萄与葡萄酒、咖啡等多种食品原料及其成品中， 严重威胁人体健康。

针对食品中 OTA 的检测， 目前已有许多方法，如薄层色谱法、高效液相色谱法、液相-质谱联用法以及酶联免疫吸附法等。这些方法往往存在仪器昂贵、分析周期长、样品预处理复杂、检测费用昂贵等问题，已经难以适应OTA检测的方便、快捷、灵敏度等方面的要求。目前急需建立一种快速，准确，灵敏且高特异性的检测方法来检测OTA的残留。

发明内容

为了实现更加灵敏、特异性的检测OTA，本申请提出了一种目标与适配体特异性结合释放触发链Tr，经链置换触发电极表面DNA四面体封闭链释放，进而引发HCR反应使CuNP被电极捕获，最终通过HNO₃溶解CuNP导致电位变化构建检测OTA的电化学生物传感器。

本发明的技术方案如下：

一种基于铜纳米颗粒的检测赭曲霉毒素A的生物传感器，包括赭曲霉毒素A的适配体Apt、触发链Tr、发夹探针H1、CuSO₄、MOPs 缓冲液 、TM缓冲液、发夹探针H2以及形成四面体的DNA链S1、S2、S3、S4和封闭链B；

所述赭曲霉毒素A的适配体Apt的序列为SEQ ID No:1；

所述触发链Tr的序列为SEQ ID No:2；

所述发夹探针H1的序列为SEQ ID No:3；

所述发夹探针H2的序列为SEQ ID No:4；

所述S1的序列为SEQ ID No:5；

所述S2的序列为SEQ ID No:6；

所述S3的序列为SEQ ID No:7；

所述S4的序列为SEQ ID No:8；

所述封闭链B的序列为SEQ ID No:9；

所述赭曲霉毒素A的适配体Apt的序列为： 5’- GATC GGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA -3’；

所述触发链Tr的序列为： 5’- TGTCCGATGCGGC TTTTTTTTTT CACCCGATC -3’；

所述发夹探针H1的序列为： 5’- GGGCGCCCGCGCG TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCGCGGGGG -3’；

所述发夹探针H2的序列为：5’- GCCCCCCCCGCGCGCG TTTTTTTTTT TTTTTTTTTTCGCG -3’；

所述S1的序列为：5’- GGCGCCCGCCGCATCGGACAACGGAGAACAAAC AACCTTTGCCTGGAGATACATGCACATTACGGCTTTCCCTATTAGAAGGTCTCAGGTGCGCGTTTCGGTAAGTAGACG -3’；