[发明专利]一种竹类植物叶脉的染色方法

权利要求书

1.一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，至少包括以下步骤：

步骤一：野外采集的新鲜竹叶立即置于50ml离心管内，用FAA溶液中固定，尽快带回实验室；

步骤二：将FAA溶液中的竹叶取出后用去离子水重新干净，在湿润状态下选择叶片中段主脉某一侧用解剖刀切取长为3cm，宽为0.6cm的竹叶切片；

步骤三：将竹叶切片置于10ml离心管内，用移液枪注入8ml 5％的氢氧化钠溶液，密封浸泡36～60h；

步骤四：将浸泡后的切片置于5.5％的次氯酸钠溶液中漂白5min，然后用蒸馏水清洗多次；

步骤五：将清洗干净的切片依次通过系列乙醇梯度溶液(20％，40％，60％，80％，100％)，每种浓度脱水30s；

步骤六：将脱水后的切片置于0.1％的番红O-乙醇溶液中染色5～6min；

步骤七：染色结束后再依次通过系列乙醇梯度溶液固色(100％，80％，60％，40％，20％)，每种浓度固色30s；

步骤八：将固色后的植物切片立即使用中性树胶封片剂制作永久玻片，在电子显微成像系统下观测叶脉染色结果。

2.根据权利要求1所述的一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，所述FAA固定溶液：5ml福尔马林(38％甲醛)、5ml冰醋酸、90ml乙醇水溶液50％、5ml丙三醇(甘油)。

3.根据权利要求1所述的一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，所述0.1％番红O-乙醇溶液：准确称取0.1000g番红O染色剂溶解于100g酒精中，置于棕色瓶内备用(保存时间3days)。

4.根据权利要求1所述的一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，所述5.5％次氯酸钠水溶液：5.5％次氯酸钠原液。

5.根据权利要求1所述的一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，所述5％氢氧化钠水溶液：称取5g氢氧化钠溶解于100ml蒸馏水中。

6.根据权利要求1所述的一种竹类植物叶脉的染色方法，其特征在于，所述梯度乙醇-水溶液(20％，40％，60％，80％，100％)：将无水乙醇和蒸馏水按浓度梯度配制两组。