[发明专利]一种对PALM1基因进行RNAi以提高豆科牧草小叶数量的应用在审
| 申请号： | 202110818468.1 | 申请日： | 2021-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN113564198A | 公开（公告）日： | 2021-10-29 |
| 发明（设计）人： | 刘海洋;王晓涵;周传恩 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;A01H6/54;A01H5/12 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 266237 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 palm1 基因 进行 rnai 提高 豆科 牧草 小叶 数量 应用 | ||
1.一种对PALM1基因进行RNAi以提高豆科牧草小叶数量的应用，其特征在于：所述PALM1基因是蒺藜苜蓿三叶发育模式关键基因PALMATA-LIKE PENTAFOLIATA1，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述对PALM1基因进行RNAi的方法是：设计引物，其中正向引物序列为CTTCCTACAATAGTTCTAGTCCT、反向引物序列为TTGGTGTTGGCTTGTTCCC，通过RT-PCR技术从紫花苜蓿中克隆PALM1基因；并为了避开该基因保守结构域，在其C端设计RNAi引物，其中所述正向引物序列为TGGATTGTGCCTTCTTTACCAT、反向引物序列为CATGACCGTTATCATCAA，扩增紫花苜蓿PALM1基因中如SEQ ID No.2所示的284bp的基因片段，命名为PALM1-C-RNAi，并将该片段转入RNAi载体pANDA35HK构建得到RNAi重组载体，命名为MsPALM1-RNAi；将构建的MsPALM1-RNAi载体进行遗传转化野生型紫花苜蓿野生型(SY4D)实验，通过愈伤再生的方式获得转基因MsPALM1-RNAi株系，实现提高豆科牧草小叶数量。
2.根据权利要求1所述对PALM1基因进行RNAi以提高豆科牧草小叶数量的应用，其特征在于：所述豆科牧草是苜蓿、紫花苜蓿或三叶草。
3.一种提高豆科牧草小叶数量的植物表达载体，其特征在于：所述植物表达载体是MsPALM1-RNAi，其中含有SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的提高豆科牧草小叶数量的植物表达载体，其特征在于：所述豆科牧草是苜蓿、紫花苜蓿或三叶草。
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