[发明专利]一种利用热对流PCR检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物对集，其特征在于，所述引物对集包括：

第一引物对，所述第一引物对包括：

如SEQ ID NO.1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.2所示的反向引物。

2.如权利要求1所述的引物对集，其特征在于，所述引物对集还包括：

内标引物对，所述内标引物对包括：

如SEQ ID NO.3所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.4所示的反向引物。

3.一种多重检测非洲猪瘟病毒核酸的探针集，其特征在于，所述探针集包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的第一探针；优选地，所述探针集还包括核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的内标探针。

4.一种基于热对流PCR检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物对集。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括权利要求3所述的探针集。

6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括选自下组的一种或多重组分：qPCR缓冲液(qPCR-Buffer)、无核酸酶水、ASFV裂解试剂、阳性质控品、内标溶液。

7.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括第一容器，所述第一容器内包含引物探针混合液，所述引物探针混合液中包含序列如SEQ ID NO.1-6所示的多核苷酸；优选地，所述第一容器还包含qPCR缓冲液(qPCR-Buffer)、和/或无核酸酶水。

8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括第三容器，所述第三容器内包含阴性质控品；和/或

所述试剂盒还包括第四容器，所述第四容器内包含阳性质控品；和/或

所述试剂盒还包括第五容器，所述第五容器内包含ASFV裂解试剂。

9.一种基于热对流PCR检测非洲猪瘟病毒的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(1)提供待检测对象的核酸样本；

(2)制备热对流PCR反应体系并进行PCR检测：

其中，所述热对流PCR反应体系包括：步骤(1)提供的所述核酸样本、本发明第一方面所述的引物对集、和本发明第二方面所述的探针组。

10.权利要求1所述的引物对集、和/或权利要求3所述的探针集的用途，用于制备PCR检测试剂盒，所述PCR检测试剂盒用于检测非洲猪瘟病毒核酸。