[发明专利]一种基于COⅠ基因鉴别绵羊毛与山羊毛的方法

权利要求书

1.一种基于COⅠ基因鉴别绵羊毛与山羊毛的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

(1)提取羊毛的DNA；

(2)利用COⅠ基因引物对提取到的DNA进行PCR扩增，扩增出380bp长度的PCR扩增产物；

(3)将PCR扩增产物经质量浓度为2％的琼脂糖凝胶电泳检测后，利用胶纯化试剂盒回收，测序得到测序结果，根据测序结果进行绵羊毛与山羊毛的物种鉴别。

2.根据权利要求1所述的一种基于COⅠ基因鉴别绵羊毛与山羊毛的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，COⅠ基因引物包括GS380-F核苷酸序列和GS380-R核苷酸序列，GS380-F核苷酸序列如SEQ ID NO.1，GS380-R核苷酸序列如SEQ ID NO.2。

3.根据权利要求1所述的一种基于COⅠ基因鉴别绵羊毛与山羊毛的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，PCR扩增的反应体系为：加入5μl羊毛DNA、0.5μl的浓度为10μmol/L的上游引物GS380-F、0.5μl的浓度为10μmol/L的下游引物GS380-R、2μl Taq酶缓冲液、2μl dNTP混合液、0.5μl Taq酶溶液，用ddH₂O将总体积补足至20μl；扩增条件为：94℃预变性1min；94℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸1min，共35个循环；72℃延伸5min；最后温度设置4℃保存。

4.根据权利要求1所述的一种基于COⅠ基因鉴别绵羊毛与山羊毛的方法，其特征在于：所述步骤(3)中：

根据以上表格的绵羊和山羊之间的核苷酸序列特征变异位点进行绵羊毛和山羊毛的物种鉴别。