[发明专利]一种树突细胞靶向的杂化树状大分子/YTHDF1 siRNA复合物及其制备和应用

权利要求书

1.一种树突细胞靶向的杂化树状大分子/YTHDF1 siRNA复合物，其特征在于，所述复合物为：表面修饰1，3-丙烷磺内酯和甘露糖、内部包裹纳米金颗粒的第五代聚酰胺-胺树状大分子G5.NH₂负载YTHDF1 siRNA，所述YTHDF1 siRNA为YTHDF1 1696 siRNA、YTHDF1 410siRNA或YTHDF1 1033 siRNA，所述YTHDF1 1696 siRNA、YTHDF1 410 siRNA、YTHDF1 1033siRNA的意义链序列分别为5'-GCACAUCAGACUGGAGAAUTT-3'、5'-CCAUCCAUUGGAUUUCCUUTT-3'、5'-GGACAUUGGUACUUGGGAUTT-3'。

2.一种树突细胞靶向的杂化树状大分子/YTHDF1 siRNA复合物的制备方法，包括：

（1）将甘露糖Mannose、第五代聚酰胺-胺树状大分子G5.NH₂与溶剂混合，搅拌反应，透析，冷冻干燥，得到G5.NH₂-Man，其中G5.NH₂和Mannose的摩尔比为1:10~13，搅拌反应温度为80~100℃，搅拌反应时间为3~5h；

（2）将步骤（1）中G5.NH₂-Man溶解于超纯水中，滴加1，3-丙烷磺内酯1,3-PS溶液，搅拌反应，透析，冷冻干燥，得到G5.NH₂-Man-PS；

（3）将步骤（2）中G5.NH₂-Man-PS溶于超纯水中，加入HAuCl₄·4H₂O水溶液，搅拌，迅速加入含NaBH₄冰水溶液，反应，透析，冷冻干燥，得到Man和1,3-PS修饰的第五代树状大分子包裹纳米金颗粒{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-Man-PS₂₀} DENPs；

（4）将步骤（3）中{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-Man-PS₂₀} DENPs与YTHDF1 siRNA共同孵育，得到树突细胞靶向的杂化树状大分子/YTHDF1 siRNA复合物，其中YTHDF1 siRNA为YTHDF1 1696siRNA、YTHDF1 410 siRNA或YTHDF1 1033 siRNA，所述YTHDF1 1696 siRNA、YTHDF1 410siRNA、YTHDF1 1033 siRNA的意义链序列分别为5'-GCACAUCAGACUGGAGAAUTT-3'、5'-CCAUCCAUUGGAUUUCCUUTT-3'、5'-GGACAUUGGUACUUGGGAUTT-3'。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中溶剂为磷酸盐缓冲盐溶液。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中G5.NH₂-Man与1,3-PS的摩尔比为1:20~23；搅拌反应温度为25~35℃，搅拌反应时间为1~2天。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中G5.NH₂-Man-PS与HAuCl₄·4H₂O的摩尔比为1:20~30；HAuCl₄·4H₂O与NaBH₄的摩尔比为1:4~1:6。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中搅拌时间为15~30min；反应时间为2~3h。