[发明专利]一种新型嵌合受体组合物、重组载体、细胞及其应用

说明书

本发明提供了一种新型嵌合受体组合物、重组载体、细胞及其应用。该新型嵌合受体组合物包括传统的嵌合抗原受体和包括NKG2D、DAP10和/或DAP12的全长序列或者截短片段的NKG2D嵌合受体，简称Dual CAR。本发明提供的嵌合受体组合物使常规CAR‑T细胞表达NKG2D胞外区及胞内信号区，扩大CAR‑T抗原识别谱，解决肿瘤异质性，在增强CAR‑T对表达目标靶抗原肿瘤细胞的杀伤能力的同时，实现了较低水平的因子释放，降低因子风暴发生的可能，增加CAR‑T安全性。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种新型嵌合受体组合物、重组载体、细胞及其应用。

背景技术

传统肿瘤治疗的方法包括手术、放疗、化疗、靶向治疗等；近些年免疫疗法的发展为肿瘤治疗领域带来深刻的改变，尤其是以CTLA-4、PD-1/PD-L1通路抑制剂为代表的免疫检查点疗法和以CAR-T为代表的过继性细胞疗法。过继性细胞疗法包括TIL、NK、TCR-T、等。其中靶向CD19的CAR-T疗法在B细胞肿瘤中取得了优秀的临床疗效，并且在2017年有两款CAR-T产品被FDA批准用于B细胞白血病或者淋巴瘤的治疗。

虽然CAR-T在血液瘤中取得了重大进展，但在治疗血液瘤中细胞因子风暴等副作用发生率较高，大部分患者在接受CAR-T治疗过程中需要使用辅助手段降低细胞因子风暴带来的副作用。CAR-T在实体瘤治疗中效果差，其中一个重要原因为肿瘤异质性，CAR-T细胞杀伤实体瘤能力较弱并且无法完全清除肿瘤细胞，另外CAR-T在实体瘤治疗因子风暴发生率及因子风暴水平较血液瘤更高，副作用更严重，获益与临床风险比低影响了临床实体瘤患者对CAR-T治疗的接受度。

现有的解决方案一般采用双靶点等解决肿瘤异质性，在治疗过程中或提前介入，采用抗体对症治疗因子风暴或在CAR-T上设计安全开关，当因子风暴发生或CAR-T过度增殖时，使用抗体中和细胞因子或清除CAR-T细胞，降低CAR-T毒副作用。

NK细胞表面表达NKG2D，通过识别其配体如MICA或MICB等激活下游信号DAP10及DAP12等从而杀伤靶细胞，T细胞表面本身也表达NKG2D，胞内表达DAP10而不表达DAP12，正常情况下T细胞表面NKG2D识别其配体后无法有效激活胞内信号，从而不能杀伤靶细胞。本发明拟设计在常规CAR-T细胞表达NKG2D胞外区及胞内信号区，扩大CAR-T抗原识别谱的同时，解决肿瘤异质性。

发明内容

为了克服现有技术中的缺陷，本发明提供了一种新型嵌合受体组合物、重组载体、细胞及其应用，扩大CAR-T抗原识别谱的同时，解决肿瘤异质性，且降低因子风暴发生的可能，增加了CAR-T安全性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面是提供一种新型嵌合受体组合物，其包括嵌合抗原受体和包括NKG2D、DAP10和/或DAP12的全长序列或者截短片段的NKG2D嵌合受体。

进一步地，该嵌合受体组合物包括嵌合抗原受体和NKG2D嵌合受体；该NKG2D嵌合受体包括NKG2D胞外区和DAP12胞内区序列。

进一步地，上述NKG2D嵌合受体还包括一个共刺激分子；该共刺激分子选自：CD28、4-1BB、DAP10、ICOS、OX40和CD40。

进一步地，上述嵌合抗原受体包括：胞外识别区、胞外铰链区、跨膜区和胞内信号区。

进一步地，上述胞外识别区包括识别肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原的抗体或抗体片段。