[发明专利]分离胎儿滋养层细胞的方法及试剂盒

权利要求书

1.抗体组合在用于分离胎儿滋养层细胞中的用途；其中，所述抗体组合包括：

A）第一抗体；或

B）第一抗体和第二抗体；其中，

所述第一抗体为负筛选抗体，其包含anti-CD44、anti-CD45和anti-CD227的组合，或包含anti-CD45和anti-CD66c的组合；

所述第二抗体为正筛选抗体，其包含anti-HLAG、anti-EpCAM和anti-Trop2中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述第二抗体为anti-HLAG、anti-EpCAM或其组合。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述第二抗体为anti-HLAG。

4.试剂盒在用于分离胎儿滋养层细胞中的用途，其特征在于，所述试剂盒包括：

（a）用于免疫磁珠法富集胎儿滋养层细胞的试剂；其中，

所述富集胎儿滋养层细胞的试剂包含抗体组合；所述抗体组合包括：

A）第一抗体；或

B）第一抗体和第二抗体；其中，

所述第一抗体为负筛选抗体，其包含anti-CD44、anti-CD45和anti-CD227的组合，或包含anti-CD45和anti-CD66c的组合；

所述第二抗体为正筛选抗体，其包含anti-HLAG、anti-EpCAM和anti-Trop2中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述第二抗体为anti-HLAG、anti-EpCAM或其组合。

6.根据权利要求4所述的用途，其中所述的试剂（a）还包括免疫磁珠。

7.根据权利要求4-6任一项所述的用途，其中所述试剂盒还包括（b）用于样本清洗的试剂。

8.根据权利要求7所述的用途，其中所述试剂（b）选自PBS、HBS或其组合。

9.根据权利要求8所述的用途，其中所述试剂（b）进一步包括EDTA、BSA或其组合。

10.分离胎儿滋养层细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提供包含胎儿滋养层细胞的母体组织样本；

（2）制备该样本的单细胞悬液；

（3）免疫磁珠法富集胎儿滋养层细胞；和

（4）细胞分选胎儿滋养层细胞；其中，

所述的步骤（3）免疫磁珠法包括：

3.1）负筛选步骤；或

3.2）负筛选步骤和正筛选步骤；

其中所述负筛选步骤包括：孵育负筛选抗体和磁珠，去除非滋养层细胞；所述正筛选步骤包括：孵育正筛选抗体和磁珠，富集胎儿滋养层细胞；

其中所述负筛选抗体为权利要求1-3任一项中所述的第一抗体；所述正筛选抗体为权利要求1-3任一项中所述的第二抗体；

其中步骤（1）所述母体组织样本选自宫颈样本。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，免疫磁珠法中，所述孵育包括以下步骤：

加入抗体孵育，然后孵育磁珠；或，

直接加入抗体-磁珠复合物孵育。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述步骤（4）细胞分选采用细胞分选仪或细胞分选柱。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述步骤（4）细胞分选采用流式细胞分选仪或基于微流控方法的细胞分选仪。