[发明专利]一种抗肿瘤药物及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种抗肿瘤药物，其特征在于：它包括外泌体和培美曲塞。

2.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物，其特征在于：制备所述抗肿瘤药物的原料中包含外泌体和培美曲塞，原料中外泌体和培美曲塞的质量比为1：(0.5～3)。

3.根据权利要求2所述的抗肿瘤药物，其特征在于：原料中外泌体和培美曲塞的质量比为1：1。

4.根据权利要求1～3任一项所述的抗肿瘤药物，其特征在于：所述外泌体为牛奶外泌体。

5.根据权利要求4所述的抗肿瘤药物，其特征在于：所述牛奶外泌体的制备方法包括以下步骤：

(1)取牛奶，离心，保留上清；

(2)取步骤(1)所得上清，加入醋酸，静置，离心，保留上清；

(3)取步骤(2)所得上清，过滤后离心，弃掉上清保留沉淀，用水或缓冲液重悬沉淀，过滤，保留滤液；

(4)取步骤(3)所得滤液，加入醋酸，离心，弃掉上清保留沉淀，即得牛奶外泌体。

6.根据权利要求5所述的抗肿瘤药物，其特征在于：步骤(1)中，离心速度为3000～5000g，离心时间为1～5min；

步骤(2)中，所述步骤(1)所得上清与醋酸的体积比为1：(80～120)，所述静置时间为3～7min，离心速度为8000～120000g，离心时间为5～15min；

步骤(3)中，离心的速度为130000～170000g，离心时间为60～120min，所述缓冲液为PBS缓冲液；

步骤(4)中，步骤(3)所得滤液与醋酸的体积比为1：(80～120)，离心的速度为130000～170000g，离心时间为60～120min；

优选的，步骤(1)中，离心速度为4000g，离心时间为3min；

步骤(2)中，所述步骤(1)所得上清与醋酸的体积比为1：100，所述静置时间为5min，离心速度为10000g，离心时间为10min；

步骤(3)中，所述过滤的孔径为0.22μm，离心的速度为150000g，离心时间为90min；

步骤(4)中，步骤(3)所得滤液与醋酸的体积比为1：100，离心的速度为150000g，离心时间为90min。

7.一种制备权利要求1～6任一项所述抗肿瘤药物的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

(i)取原料外泌体，加入水或缓冲液，混合均匀得到外泌体悬液；

(ii)取外泌体悬液和原料培美曲塞，混合均匀，超声处理，静置，离心，弃掉上清保留沉淀，即得抗肿瘤药物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤(i)中，所述外泌体悬液的浓度为50～500μg/mL，所述缓冲液为PBS缓冲液；步骤(ii)中，所述静置的时间为0.5～2h，离心速度为130000～170000g，离心时间为60～120min；

优选的，步骤(i)中，所述外泌体悬液的浓度为100μg/mL；步骤(ii)中，所述静置的时间为1h，离心速度为150000g，离心时间为90min。

9.权利要求1～6任一项所述抗肿瘤药物在制备预防和/或治疗对EGFR抑制剂耐药的肺癌的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述EGFR抑制剂为吉非替尼；和/或，所述肺癌为非小细胞肺癌。