[发明专利]RNA中m5

权利要求书

1.一种用于肿瘤早期预警检测的双重分析的逻辑光电化学传感器，其特征在于，所述用于肿瘤早期预警检测的双重分析的逻辑光电化学传感器包括：

不同浓度的m⁵C靶序列与10^-7M m⁶A靶序列共同孵育后的DNA步行器1，用于在同一根电极表面检测光电信号；

当不同浓度的m⁶A靶序列与10^-7M m⁵C靶序列共同孵育后的DNA步行器2，用于在同一根电极表面检测光电信号。

2.如权利要求1所述的用于肿瘤早期预警检测的双重分析的逻辑光电化学传感器，其特征在于，所述DNA步行器1，用于在同一根电极表面检测的465nm波长下的光电信号；

所述DNA步行器2，用于在同一根电极表面检测的625nm波长下的光电信号。

3.一种利用权利要求1～2任意一项所述用于肿瘤早期预警检测的双重分析的.逻辑光电化学传感器的RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法，其特征在于，所述RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法包括以下步骤：

步骤一，构建H型纳米支架；

步骤二，进行DNA步行器的构建；

步骤三，进行DNA折纸的构建；

步骤四，进行电极表面修饰和光电信号检测。

4.如权利要求3所述RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法，其特征在于，步骤一中，所述构建H型纳米支架，包括：

用四条寡核苷酸序列构建H型纳米支架；

配置TM杂交缓冲液，用该缓冲液稀释A、B、A1、B1，等比杂交使终浓度为2μM，快速退火得到H型结构，并用15％的聚丙烯酰胺凝胶电泳在150V的电压下验证是否正确形成；其中，所述TM杂交缓冲液由10mM tris-盐酸、1mM EDTA以及12.5mM氯化镁组成；

所述退火，包括：

于90℃10min，迅速退火到4℃持续0.5h以上，取出放入4℃储存备用；

所述A的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述B的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述A1的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述B1的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

5.如权利要求3所述RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法，其特征在于，步骤二中，所述DNA步行器的构建，包括：

用链霉亲和素标记的Fe₃O₄磁珠作为支撑基体构建DNA步行器，生物素标记L1和S1链，将S1和outputA在37℃杂交2h形成双链结构；

用结合缓冲液清洗磁珠三次，将磁珠重悬于结合缓冲液中，将L1和S1/outputA按照一定比例加入一定量的磁珠中，37℃振荡混合40min，使磁珠与L1和S1充分反应结合，并用TM缓冲液清洗备用；L2、S2和磁珠的连接体的制备方法同理。

6.如权利要求5所述RNA中m⁵C和m⁶A双重分析的逻辑光电化学传感方法，其特征在于，所述L1的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，所述S1的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示，所述outputA的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，所述L2的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示，所述S2的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示。