[发明专利]一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤，S1：外植体的选择与处理阶段：S11：选取健壮带芽的茎秆清洗浸泡，埋入放置于人工气候箱内泥炭土的框中，取黑皮果蔗幼嫩腋芽切下，酒精溶液浸泡之后浸入汞溶液，用无菌水冲洗沥干；S2：培养阶段：S21：取黑皮果蔗幼嫩腋芽放入初代培养基中培养，将丛生芽接种到增殖培养基中进行增殖，移到生根诱导培养基上进行生根培养；S3：炼苗移栽阶段：培苗移到自然光下炼苗，处理好的黑皮果蔗苗种于疏松透气的苗床上苗高在13~15cm时便可分单株。由此建立黑皮果蔗优良单株组培苗生产体系，实现较高种苗繁殖系数，获得一致性高的脱毒种苗，用于大规模生产，利于无毒黑皮果蔗的种苗快速繁殖。

技术领域

本发明涉及植物培育技术领域，具体为一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法。

背景技术

甘蔗（SaccharumoficinarumL.）属禾本科，甘蔗属，既是一种最为重要的糖料作物，也是一种重要的能源作物，在我国糖业和能源方面发挥着重要的作用，甘蔗有热带种、中国种、印度种、野生种、河八王、肉质花穗野生种等，其中热带种为栽培种之一，原产于南太平洋，大洋洲诸岛，后传入我国，现在广东、广西、福建、海南、四川、台湾、云南等省区广为种植的是热带种与其他种或野生种杂交而成的一批高产、高糖、抗逆性较强的具有热带种亲缘的杂交种。

甘蔗是无性繁殖作物，也是多年宿根栽培作物，多年种植尤其是宿根种植易遭受一些病原物的反复侵染和危害，危害甘蔗生产的主要病害有凤梨病、赤腐病、黑穗病、赤斑病、花叶病和宿根矮化病等，其中花叶病和宿根矮化病是目前生产上采用一般的物理和化学方法难以消除的两种病害，常导致甘蔗植株变矮、节间缩短、糖分下降，使得甘蔗产量减少、质量下降，干旱时这两种病害的感病率可高达100%，在我国蔗区，花叶病、宿根矮化病相当普遍，所有的栽培品种都受到不同程度的危害，一般宿根矮化病可使甘蔗减产10%~30%，花叶病可使甘蔗减产10%~40%，干旱地区病害更为严重，花叶病、宿根矮化病已成为我国蔗区甘蔗单位面积产蔗量和产糖量提高的主要限制因素，解决这些病害的危害具有重要的经济和现实意义。

目前，巴西在生产上使用这种脱毒健康种苗可使甘蔗增产20%40%(个别蔗区增产高达60%)，蔗糖分提高0.5%以上(绝对值)，我们通过甘蔗茎段的热处理结合茎尖分生组织培养有效的除去了甘蔗优良品种中带有的病毒，实现了脱毒与快繁的统一，甘蔗要想在短期内大面积的种植，用传统的繁殖方式是不可能的，通常一个芽段一年也只能繁殖出几十个芽段，若发展到几万或几十万亩的种植量，需要多年的时间。

所以我们提出了一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法，以便于解决上述中提出的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法，以解决上述背景技术提出的目前市场上甘蔗要想在短期内大面积的种植，用传统的繁殖方式是不可能的，通常一个芽段一年也只能繁殖出几十个芽段，若发展到几万或几十万亩的种植量，需要多年时间的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种黑皮果蔗脱毒的组织培养快速繁殖方法，包括以下操作步骤：

S1：外植体的选择与处理阶段：

S11：选取田间健壮带芽的茎秆，洗净，水中浸泡20min，埋入装有泥炭土的框中，放入人工气候箱中38℃温热处理，待腋芽长8~10cm，可取用

S12：取黑皮果蔗幼嫩腋芽作为外植体，将人工气候箱中的幼嫩腋芽切下，然后在超净台上，用75%的酒精溶液浸泡30s，再浸入0.1%升汞溶液12~15min，用无菌水冲洗5~7次，每次1min，沥干水分；

S2：培养阶段：

S21：取处理好的黑皮果蔗幼嫩腋芽的茎尖分生组织0.8~1.5mm，放入初代培养基中培养，培养温度为25~28℃，在自然散射光下培养，期间每10d更换一次新鲜培养基，防止褐化，提高无菌株系获得率；

S22：待丛生芽产生后，将这些芽送到植株病毒检测中心检测，经过检验证明植株不带病毒，即可取其做下一步的增殖培养；