[发明专利]一种用于检测FLT3-F691L突变的crRNA、等温扩增引物和试剂盒有效
| 申请号： | 202110765354.5 | 申请日： | 2021-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN113584167B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 刘银;周芙玲;王鑫杰;灿灿 | 申请（专利权）人： | 武汉大学中南医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/113;G01N33/543;G01N33/533;G01N33/558 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 江慧 |
| 地址： | 430071 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 flt3 f691l 突变 crrna 等温 扩增 引物 试剂盒 | ||
1.一种用于检测FLT3-F691L突变的crRNA，其特征在于，所述crRNA的核苷酸序列如SEQID NO.3所示。
2.一种用于检测FLT3-F691L突变的等温扩增引物，其特征在于，所述等温扩增引物包括如SEQ ID NO.13所示的上游引物和如SEQ ID NO.16所示的下游引物。
3.一种权利要求1所述的crRNA或/和权利要求2所述的用于检测FLT3-F691L突变的等温扩增引物在制备用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒上的用途。
4.一种用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的crRNA、以及Cas12a蛋白和荧光探针。
5.如权利要求4所述的用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，所述荧光探针为ssDNA-FQ reporter，所述荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示，所述荧光探针的序列的5’端均标记有荧光基团，3’端标记均有猝灭基团。
6.如权利要求5所述的用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒使用时，检测体系包括：Cas12a蛋白200ng、crRNA1pM和ssDNA-FQ reporter 25pmol。
7.如权利要求4所述的用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA酶抑制剂。
8.如权利要求4所述的用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括权利要求2所述的用于检测FLT3-F691L突变的等温扩增引物。
9.如权利要求4-8任一所述的用于检测FLT3-F691L突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括荧光检测试剂盒或者胶体金检测试剂盒。
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