[发明专利]一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法

权利要求书

1.一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

包括以下步骤：

S1：一次分离；对待分离的血浆进行超滤操作，得到中间样品；

S2：二次分离；将所述中间样品与含有汽巴兰的分离载体混合，将所述脂蛋白从所述中间样品中分离出来。

2.如权利要求1所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述含有汽巴兰的分离载体为汽巴兰修饰的磁珠。

3.如权利要求2所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述磁珠包括氨基磁珠、羧基磁珠、硅基磁珠、环氧基磁珠、链霉亲或素磁珠中的至少一种。

4.如权利要求3所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述磁珠为的粒径为1～3μm。

5.如权利要求4所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述磁珠上汽巴兰的修饰密度为2～10mmol/L。

6.如权利要求1至5任一项所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

在所述S2步骤中，使用微流控芯片分离所述脂蛋白和外泌体；其中，所述微流控芯片包括通道层和基底层，所述通道层位于所述基底层上；

所述通道层包括顺次连通的进样区域和混合区域；所述进样区域包括进样口和进样通道，所述中间样品与所述含有汽巴兰的分离载体从所述进样口注入，并通过所述进样通道进入所述混合区域；

所述混合区域包括若干个混合单元，每个所述混合单元包括至少1个宽通道和至少1个窄通道，所述宽通道的宽度为100～300μm，所述窄通道的宽度为所述宽通道宽度的1/5～1/2。

7.如权利要求6所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述混合区域包括不少于100个所述混合单元，每个所述混合单元包括1个宽通道和1个窄通道；所述宽通道的长度为200～500μm，所述窄通道的长度不大于所述宽通道的长度；

其中，所述进样流速为1～10μL/min。

8.如权利要求6所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述通道层还包括检测区域，所述中间样品与所述含有汽巴兰的分离载体通过所述混合区域进入所述检测区域；所述检测区域包括至少1个腔室，所述腔室的高度不小于0.5mm。

9.如权利要求8所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述检测区域包括顺次连通的脂蛋白检测腔室和外泌体检测腔室；所述混合区域与所述脂蛋白检测腔室连通，所述脂蛋白检测腔室与所述外泌体检测腔室连通，其中，所述脂蛋白检测腔室的的高度为0.5～1.5mm。

10.如权利要求9所述的一种分离血浆脂蛋白和外泌体的方法，其特征在于：

所述微流控芯片还包括磁铁，所述磁铁设置在所述脂蛋白检测腔室的下方，混合样品流经所述脂蛋白检测腔室时，所述含有汽巴兰的分离载体停留在所述脂蛋白检测腔室，其他部分流入所述外泌体检测腔室，其中，所述外泌体检测腔室的高度为5～10mm。