[发明专利]伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法及应用在审
申请号: | 202110761485.6 | 申请日: | 2021-07-06 |
公开(公告)号: | CN113519461A | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 江斌;袁永明 | 申请(专利权)人: | 江西中洪博元生物技术有限公司 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;A61K49/00;A61D7/00 |
代理公司: | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人: | 刘召民 |
地址: | 330052 江西省南昌市南昌*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 刀豆 球蛋白 诱导 小鼠 干眼症 模型 构建 方法 应用 | ||
1.伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,包括:配制10-15mg/ml的刀豆球蛋白A PBS溶液,分装为20±2μl/滴,使用时用胰岛素注射针吸取一滴,注射到小鼠一侧泪腺即可。
2.根据权利要求1所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,其特征在于,所述小鼠为成年Balb/C小鼠,体重为20-25g。
3.根据权利要求1所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,其特征在于,还包括造模后第三天进行模型验证。
4.根据权利要求3所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,其特征在于,所述模型验证的方法包括:在全身麻醉和无局部麻醉状态下利用酚红棉线对小鼠泪液分泌量进行检测,酚红棉线染色长度达5mm认为小鼠泪液分泌正常,染色长度为2mm则认为小鼠泪液分泌不足,造模成功。
5.根据权利要求3所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,其特征在于,所述模型验证的方法包括:采用3%Lissamine Green B染色剂对小鼠进行滴眼,持续1min,纱布吸去多余染液,此后在显微镜下观察小鼠角膜染色情况,正常小鼠眼球不着色,成模小鼠角膜染为蓝色。
6.根据权利要求3所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法,其特征在于,所述模型验证的方法包括:使用RT-PCR对小鼠泪腺RNA进行检测,泪腺萎缩后RNA含量将降低,体现在RT-PCR目的扩增片段CT值增加。
7.权利要求1-6任意一项所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法的应用,包括在用于治疗干眼症的药物研发中的应用。
8.根据权利要求7所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法的应用,其特征在于,所述应用包括:构建干眼症动物模型后,根据分组对动物执行治疗方案,待治疗方案周期结束后,通过包括病理、生化检测在内的相关检测来确认治疗药物是否有效。
9.根据权利要求8所述的伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠干眼症模型的构建方法的应用,其特征在于,所述分组包括模型组、正常对照组、阳性药物组和阴性药物组。
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