[发明专利]利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基及制备方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基及制备方法，所述雨生红球藻细胞在培养基中加入海水和营养母液，采用湿藻接种的方法对雨生红球藻细胞培养并对其生长和繁殖进行观察，采用湿地接种的方法对雨生红球藻细胞进行接种培养，采用含有旧液的雨生红球藻藻种直接种于新鲜的培养基中，使在接种时更加方便快捷，使在短时间内可对更多的雨生红球藻细胞进行接种，提高接种效率，采用海水的加入培养基进行氮饥饿处理，以及对雨生红球藻细胞进行光照，湿度等培养环境的控制，为雨水红球藻细胞的繁殖和生长提供更优良的环境，使雨水红球藻细胞更易于大量生长和繁殖，进而提高雨水红球藻细胞的繁殖速率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基及制备方法。

背景技术

雨生红球藻(Haematococcus plavialis)分类上属于绿藻门(Chorophata)、绿藻纲(Chorophyceae)、团藻目(Volvocales)、红球藻科(Haem matococcaceae)、红球藻属(Haematococcus,Ag)，雨生红球藻细胞的形状大多数呈现为广卵形,宽度约为19um-51um,长度约为28um-63um.雨生红球藻是单细胞藻类,用孢子或合子进行生殖内外细胞壁层的主要成分分别是是纤维素和果胶质,自由游动的雨生红球藻细胞大多含有2条鞭毛,含有多个不规则的散布在原生质体内的伸缩泡，由于游动的雨生红球嘉细胞内用于进行光合作用的色素成份含有叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和类胡萝卜素,因此细胞呈绿色，雨生红球藻的细胞形态描述为四种，游动细胞(motile cell),指游动阶段除游动孢子以外的细胞形式,细胞呈卵形或椭圆形，动孢子(z0ospore),可以由游动细胞和不动孢子在适宜条件下经过无性繁殖产生。繁殖过程中,由细胞壁演化成的孢子素膨变大,从顶端逐步破裂释放出能自由游动的子细胞。这些从在母细胞内产生起到释放出孢子素为止的具有游动能力的子细胞称为游动孢子，静细胞(non-motile celly)指不运动阶段除不动孢子以外的细胞形态,在名称上与游动阶段的游动细胞相呼应，静孢子(aplanospore),不动阶段细胞表面上不游动呈静止状态,但是细胞不一定处于静止的休眠状态，实际上,该阶段细胞仍能进行分裂增殖,在母细胞内产生没有鞭毛,发育至冲破细胞壁释放后也不能游动的子细胞。这种由不动细胞经过无性生殖方式产生,到从孢子囊内释放时期的子细胞称为不动孢子，环境适宜时,游动细胞以有丝分裂的方式进行无性繁殖,多数母细胞产生2-4个子细胞。无论母细胞内有2个或是4个子细胞,都能观察到鞭毛的存在并能够自由游动，属于游动孢子，释放出的子细胞游动孢子成为新的游动细胞，不懂细胞发育成孢子母细胞和孢子囊，最终孢子从鹏达的孢子囊壁中释放出来成为有鞭毛的游动孢子并残留下透明外壳，环境不适宜时，游动细胞或者刚释放的游动孢子退去鞭毛，直接转入不动细胞阶段。

就目前的雨生红球藻细胞的培养时，对培养环境如光照强度，光照颜色，营养元素等无法进行准确把控，进而对雨生红球藻细胞的繁殖生长造成抑制，不利于雨生红球藻细胞的繁殖，进而不利于下一工序对虾青素的积累和提取，同时采用干藻接种操作繁琐，不利于雨生红球藻细胞的快速繁殖，减低繁殖速率。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基制备工艺，解决了雨生红球藻细胞培养环境不适宜同时培养繁殖生产效率低下等问题。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、海水处理：取海水过滤、灭菌，制得处理后的海水；

步骤2：母液制备：取KNO₃、K₂HPO₄、EDTA-Na₂、VB₁、VB₁₂、FeSO₄.7H₂O、NaHCO₃MnSO₄与水混合，杀菌；