[发明专利]利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基及制备方法在审
申请号: | 202110747575.X | 申请日: | 2021-07-01 |
公开(公告)号: | CN113278577A | 公开(公告)日: | 2021-08-20 |
发明(设计)人: | 赵子方;周永辉;郭红星;周尽学 | 申请(专利权)人: | 海南三元星生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38;C12N1/12;C12N13/00;C12R1/89 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张柳 |
地址: | 570206 海南省海口市龙*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 海水 促进 雨生红球藻 细胞 生长 繁殖 培养基 制备 方法 | ||
1.利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的培养基的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1、海水处理:取海水过滤、灭菌,制得处理后的海水;
步骤2:母液制备:取KNO3、K2HPO4、EDTA-Na2、VB1、VB12、FeSO4.7H2O、NaHCO3MnSO4与水混合,杀菌;
步骤3:取培养基、步骤1制得的所述处理后的海水与步骤2制得的母液混合,制得混合培养基。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1中所述过滤采用膜过滤或活性炭过滤。
3.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,步骤2中所述母液制备具体为:以100ml为例,称取KNO3100mg,K2HPO410mg,EDTA-Na210mg,VB16*10-3mg,VB12 5*10-5mg,FeSO4.7H2O 2.5mg,NaHCO3100mg,和MnSO40.25mg,用水定容至100ml。
4.如权利要求1至3任一项所述的制备方法制得的培养基。
5.如权利要求4所述的培养基在利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖中的应用。
6.利用海水促进雨生红球藻细胞生长繁殖的方法,其特征在于,取保存的雨生红球藻藻种活化,湿藻接种于如权利要求4所述的培养基中,培养,检测。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述湿藻接种的接种量为15%。
8.如权利要求6或7所述的方法,其特征在于,所述培养采取的培养方式为通气细胞悬浮培养,所述培养的条件为:光照强度1000~1500lx,光照周期为24h,光质为白光,光照方式为单侧光,培养温度为9~11℃,通空气,初始pH为7.0,培养时间为25d。
9.如权利要求6至8任一项所述的方法,其特征在于,所述检测采用卢戈式固定液处理,在560nm波长下测定吸光度值;所述检测还包括采用pH试纸测定pH值;
取1mL雨生红球藻的培养液加1*10-3mL卢戈式固定液,静置1min后采用血球计数板和10*40倍镜的显微镜对藻细胞密度进行血球板计数。
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