[发明专利]一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法

权利要求书

1.一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，包括：

(1)将重金属污染的土壤样品配制成土壤悬浊液涂布于含Cd/Cr的LB固体培养基平板上，得到耐Cd/Cr的菌株；

(2)将形态差异明显的菌株分别接种在LB固体培养基平板上进行纯化培养；

(3)纯化后得到的单一菌株分别接种于加有含Cd/Cr的LB液体培养基的96孔板中，利用酶标仪在不同时刻监测菌株的OD₆₀₀值。

2.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，所述土壤悬浊液采用以下方法配制：将土壤样品与无菌水按照1:10的重量比进行混合，在28℃条件下150r/min振荡30min后静置10min。

3.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，所述LB固体培养基具体包括以下组分：胰蛋白胨：10g/L，酵母提取物：5g/L，NaCl：10g/L，琼脂15-20g/L。

4.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，步骤(1)中所述含Cd/Cr的LB固体培养基中Cd/Cr的浓度梯度为5/100mg/L、10/150mg/L、15/200mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，步骤(3)中所述含Cd/Cr的LB液体培养基具体包括以下组分：胰蛋白胨：10g/L，酵母提取物：5g/L，NaCl：10g/L，Cd/Cr浓度为15/200mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，步骤(3)还包括用生理盐水将菌种配制成菌悬液并以生理盐水为参比，用紫外分光光度计测定菌悬液的浓度。

7.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，步骤(3)中所述96孔板的每个样品孔中加入20μL菌悬液。

8.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，所述酶标仪采用Tecan infinite 200酶标仪。

9.根据权利要求1所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法，其特征在于，还包括以时间为横坐标，以600nm处的吸光值为纵坐标绘制菌株的生长曲线，对应斜率表示该时间段菌株的生长趋势。

10.权利要求1-9任意一项所述的一种快速筛选耐重金属Cd/Cr微生物的方法的应用，所述应用包括在筛选对重金属Cd/Cr有耐性的微生物以及筛选对重金属污染土壤有修复效果的微生物中的应用。