[发明专利]采用HPLC检测甲磺酸帕珠沙星原料药中有关物质的方法

说明书

本发明公开了一种采用HPLC检测甲磺酸帕珠沙星中有关物质的方法，包括以下步骤：配制甲磺酸帕珠沙星原料药的供试品溶液，取所述供试品溶液进行稀释，得到对照溶液；分别以体积比为30:10:7:170的乙腈‑10％甲磺酸三乙胺溶液‑1.0mol/L磷酸氢二钾‑水作为第一流动相，以体积比为45:10:7:138的乙腈‑10％甲磺酸三乙胺溶液‑1.0mol/L磷酸氢二钾‑水作为第二流动相对甲磺酸帕珠沙星原料药进行检测。因此，本申请通过将第一流动相和第二流动相联合使用，可以更准确更科学地对甲磺酸帕珠沙星原料药的有关物质进行检测。

技术领域

本发明涉及甲磺酸帕珠沙星的质量控制领域，特别涉及采用HPLC检测甲磺酸帕珠沙星原料药中有关物质的方法。

背景技术

甲磺酸帕珠沙星是由日本研究开发的新型氟喹诺酮类抗菌药，为帕珠沙星的甲磺酸盐，具有抗菌谱广、抗菌活性高、副作用小以及耐受性好等特点。临床用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌感染，如支气管及肺部感染、细菌性痢疾、泌尿系统、皮肤和软组织等感染。

在甲磺酸帕珠沙星的合成过程以及后续的贮藏、运输、使用过程中，可能会产生一些与甲磺酸帕珠沙星结构相类似的有关物质(related substances)，有关物质对于药物的疗效甚至安全性都可能会产生影响，因此，对于药品的质量控制而言，有关物质的检测是必不可少的。

高效液相色谱(HPLC)可以用于检测甲磺酸帕珠沙星中的有关物质。在已知的HPLC检测甲磺酸帕珠沙星中的有关物质的方法中，采用乙腈-10％甲磺酸三乙胺-1M磷酸氢二钾-水(30:10:7:153)作为流动相。本申请的发明人发现，采用该流动相进行检测时，有关物质与主药(甲磺酸帕珠沙星)的分离不理想。而且发明人进一步发现，采用该流动相检测有关物质时，对于保留时间位于主药之后的极性相对较小的有关物质无法有效地进行检测。

因此，有必要进一步改进HPLC的流动相，以更全面、准确地检测甲磺酸帕珠沙星原料药中的有关物质。

发明内容

本发明提供一种采用HPLC检测甲磺酸帕珠沙星原料药中有关物质的方法，以更全面、准确地检测甲磺酸帕珠沙星原料药中有关物质。

技术方案如下：

一种采用HPLC检测甲磺酸帕珠沙星原料药中有关物质的方法，包括以下步骤：

(1)配制甲磺酸帕珠沙星原料药的供试品溶液，取所述供试品溶液进行稀释，得到对照溶液；

(2)以体积比为30:10:7:170的乙腈-10％甲磺酸三乙胺溶液-1.0mol/L磷酸氢二钾-水作为第一流动相，分别取供试品溶液和对照溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图至2倍的甲磺酸帕珠沙星特征峰保留时间；

(3)以体积比为45:10:7:138的乙腈-10％甲磺酸三乙胺溶液-1.0mol/L磷酸氢二钾-水作为第二流动相，分别取供试品溶液和对照溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图至7倍的甲磺酸帕珠沙星特征峰保留时间；

(4)将步骤2中获得的供试品溶液谱图中保留时间小于甲磺酸帕珠沙星特征峰的有关物质峰面积与步骤2中获得的对照溶液谱图中的甲磺酸帕珠沙星的特征峰面积进行比较，并且

将步骤3中获得的供试品溶液谱图中保留时间大于甲磺酸帕珠沙星特征峰的有关物质峰面积与步骤3中获得的对照溶液谱图中的甲磺酸帕珠沙星的特征峰面积进行比较。

在本申请的一些实施方式中，以第一流动相为溶剂，配制所述供试品溶液和所述对照溶液。

在本申请的一些实施方式中，所述供试品溶液中甲磺酸帕珠沙星原料药的浓度是所述对照溶液的100倍。

在本申请的一些实施方式中，所述供试品溶液中甲磺酸帕珠沙星原料药的浓度为0.3mg/ml。

在本申请的一些实施方式中，步骤2和步骤3中的进样量为20μl。