[发明专利]HADHA mRNA的干扰序列及其验证方法在审
| 申请号： | 202110730826.3 | 申请日： | 2021-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN113430199A | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 王娟娟;张杰;练杨华;黄亚运 | 申请（专利权）人： | 武汉三鹰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 430070 湖北省武汉市东*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hadha mrna 干扰 序列 及其 验证 方法 | ||
1.HADHA mRNA的干扰序列，其特征在于，所述干扰序列的正义链如SEQ ID NO：1所示，所述干扰序列的反义链如SEQ ID NO：2所示。
2.根据权利要求1所述的HADHA mRNA的干扰序列，其特征在于，所述干扰序列的正向引物如SEQ ID NO：7所示，所述干扰序列的反向引物如SEQ ID NO：8所示。
3.如权利要求1所述的HADHA mRNA的干扰序列的验证方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将干扰序列的正反引物克隆构建在真核表达载体质粒上；（2）将步骤（1）中构建好的质粒与一个包装质粒、一个穿梭质粒混合进行转染，并使用293T细胞包装慢病毒；（3）将慢病毒感染目的细胞并进行puromycin药物的筛选；（4）收集细胞进行western blot及Immunofluorescence验证。
4.根据权利要求3所述的HADHA mRNA的干扰序列的验证方法，其特征在于，步骤（1）中所用的真核表达载体质粒为pLVX-sh-zsGreen-Puro。
5.根据权利要求3所述的HADHA mRNA的干扰序列的验证方法，其特征在于，步骤（2）中所用的包装质粒为pMD2.G。
6.根据权利要求3所述的HADHA mRNA的干扰序列的验证方法，其特征在于，步骤（2）中所用的穿梭质粒为psPAX2。
7.根据权利要求3所述的HADHA mRNA的干扰序列的验证方法，其特征在于，步骤（3）中的目的细胞为hela细胞。
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