[发明专利]一种腺苷参与的全酶法NMN合成方法有效
申请号: | 202110728796.2 | 申请日: | 2021-06-29 |
公开(公告)号: | CN113549663B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 金彩科;赵媛 | 申请(专利权)人: | 康盈红莓(中山)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/30 | 分类号: | C12P19/30 |
代理公司: | 广东法仁律师事务所 44870 | 代理人: | 杜玮 |
地址: | 528400 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 腺苷 参与 全酶 nmn 合成 方法 | ||
1.一种腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其特征在于,包括同一反应体系下加入腺苷、磷酸盐、可被酵母细胞代谢的糖类、酵母细胞、NAMPT、烟酰胺、核糖或PRPP进行一锅化反应以完成以下步骤:
(A)腺苷、磷酸盐以及可被酵母细胞代谢的糖类在酵母细胞的催化作用下反应生成ATP的步骤;和
(B)酶促反应生产NMN的步骤,包括在NAMPT作用下,烟酰胺、PRPP以及ATP反应生成NMN、ADP以及磷酸盐的步骤,其中所述步骤(B)中生成的ADP和磷酸盐自动用于所述步骤(A)中在酵母细胞作用下再生为ATP,以同时执行利用酵母细胞依能量代谢发酵反应生成ATP以及利用ATP进行酶促反应生成NMN的两个步骤,其中酵母细胞是进行氧化磷酸化代谢的酵母细胞并被保持在所述同一反应体系中,以在酶促反应生产NMN的步骤结束后将所述同一反应体系中生成的磷酸盐产物通过能量代谢的方式去除。
2.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述步骤(B)中还包括5-磷酸核糖和ATP在RPPK的催化作用下反应生成PRPP和AMP的步骤。
3.根据权利要求2所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法进一步包括AMP和磷酸盐在酵母细胞作用下转化为ADP的步骤。
4.根据权利要求2所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述步骤(B)中进一步包括核糖和ATP在RK的催化作用下反应生成5-磷酸核糖和ADP的步骤。
5.根据权利要求4所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,RK、RPPK以及NAMPT以液酶形态和固定化酶形态中的至少一种原始形态存在。
6.根据权利要求5所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,腺苷与核糖的摩尔比范围是0.01~1。
7.根据权利要求6所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,核糖与磷酸盐的摩尔比范围是1~20。
8.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,可被酵母细胞代谢的糖类选自葡萄糖、蔗糖、淀粉以及甘油中的至少一种。
9.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,酵母细胞选自毕赤酵母和酿酒酵母中的至少一种。
10.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,进一步添加有金属离子。
11.根据权利要求10所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,添加的金属离子选自镁离子和锰离子中的至少一种。
12.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,腺苷与烟酰胺的摩尔比范围是0.01~1。
13.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,烟酰胺与磷酸盐的摩尔比范围是1~20。
14.根据权利要求1所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法,其中在所述的腺苷参与的全酶法NMN合成方法的反应体系中,酵母细胞是冰冻储存过的湿酵母。
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