[发明专利]一种连续流生物催化合成阿扎那韦中间体氯醇的方法

权利要求书

1.一种连续流生物催化合成阿扎那韦中间体氯醇的方法，其特征在于，使用羰基还原酶OdCR1催化(S)-叔丁基(4-氯-3-羰基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯不对称还原制备光学活性叔丁基((2S,3R)-4-氯-3-羟基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯，葡萄糖脱氢酶提供辅酶循环，酶促反应是在连续流微反应器中发生；

所述羰基还原酶OdCR1的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；

将羰基还原酶OdCR1、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和NADP⁺配制成溶液一，将(S)-叔丁基(4-氯-3-羰基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯配制成溶液二，溶液一、溶液二按比例持续地通入连续流微反应器中进行反应，通过生物催化反应后经环化及纯化得到叔丁基((2S,3R)-4-氯-3-羟基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯；

所述羰基还原酶OdCR1与葡萄糖脱氢酶的活力比为1:1.5；

所述葡萄糖与(S)-叔丁基(4-氯-3-羰基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯的摩尔比为1.5：1；

底物(S)-叔丁基(4-氯-3-羰基-1-苯丁基-2-基)氨基甲酸酯在反应液中的浓度为1～2mmol/L；

所述羰基还原酶OdCR1的用量为1～500U/L；

所述连续流微反应器为连续流微通道反应器，由3片微反应器芯片连接组成，3片微反应器芯片分别设置为3层，第一层微反应器芯片设置两个进料口，第三层微反应器芯片设置一个出料口，第二层微反应器芯片与第一层微反应器芯片和第三层微反应器芯片连接，每个微反应器芯片都有若干个用于液体混合反应的混合反应腔，溶液一和溶液二从两个进料口分别进入并混合后，依次穿过第一层微反应器芯片的每个混合反应腔、第二层微反应器芯片的每个混合反应腔以及第三层微反应器芯片的每个混合反应腔，再从第三层微反应器芯片的出料口流出，第一层微反应器芯片、第二层微反应器芯片、第三层微反应器芯片上的混合反应腔均作为进行连续的混合反应的场所。