[发明专利]黄瓜雌性系性状相关SCAR标记及其应用有效
申请号: | 202110721114.5 | 申请日: | 2021-06-28 |
公开(公告)号: | CN113249514B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 杨宗辉;曹齐卫;孟昭娟;李利斌;陈伟;高天 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 房一粟 |
地址: | 250100 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄瓜 雌性 性状 相关 scar 标记 及其 应用 | ||
1.一种黄瓜雌性系性状相关SCAR标记筛选黄瓜雌性系材料的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)提取待测黄瓜的基因组DNA;
2)以待测黄瓜的基因组DNA为模板,利用标记引物进行PCR扩增反应;所述的标记引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
3)检测扩增产物,标记扩增结果判断待鉴定品种,具有356bp条带的材料为雌性系材料,标记扩增无条带的材料为非雌性系材料;所述的SCAR标记的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的筛选黄瓜雌性系材料的方法,其特征在于,步骤2)中所述的PCR扩增反应的反应体系为20lμl,具体如下:
10ng/μl模板DNA 2μl,10pmol/μl上游引物1μl,10pmol/μl下游引物1μl,2X M5 HiPerplus taqHiFi PCR mix 10μl,超纯水6μl。
3.如权利要求1所述的筛选黄瓜雌性系材料的方法,其特征在于,步骤2)中所述的PCR扩增反应的扩增程序为:
95℃预变性1min;然后95℃变性15s,55℃退火15s,45s,72℃延伸30s,共计30个循环;最后72℃延伸10min。
4.如权利要求1所述的黄瓜雌性系性状相关SCAR标记的引物在筛选黄瓜雌性系材料和回交转育的辅助选择方面的应用。
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